刘艳军 张 超 杨静慧* 李 冰 刘 婷 秦艳筠

(1.天津农学院园艺园林学院，天津 300384； 2.日本筑波大学生命与环境科学学院，筑波 305-8572)

塔杨松散型均质胚性愈伤组织培养体系

刘艳军1张 超2杨静慧1*李 冰2刘 婷1秦艳筠1

(1.天津农学院园艺园林学院，天津 300384；2.日本筑波大学生命与环境科学学院，筑波 305-8572)

为了获得塔杨(Populus×canadensisMoench ‘Tower’)松散型、均质、胚性愈伤组织(LHEC)，以塔杨试管苗叶片为外植体，通过不同浓度激素(BA、KT、2,4-D)、蔗糖和无机盐处理，建立了松散型愈伤组织(LC)诱导—继代培养—胚性愈伤诱导的高效体系。结果显示：塔杨叶片在低蔗糖和低无机盐(1/4MS+2 mg·L-12,4-D+1 mg·L-1BA+10 g·L-1)的培养基上培养可以诱导出完全的LC(诱导率100%)。LC在继代培养基(MS+2.0 mg·L-12,4-D+2.0 mg·L-1BA+Vc100 mg·L-1+30 g·L-1)上进行2～3次转接后，再转移到LHEC培养基(MS+0.5 mg·L-12,4-D+3 mg·L-1BA+Vc100 mg·L-1+40 g·L-1蔗糖)上培养4～5周(每7天转接1次)，即可诱导出具有许多球状体(原胚状体)的松散型胚性愈伤组织。此外，适当的2,4-D与BA浓度比例，可以使LC保持细胞的松散特性、不形成根、无褐变，生长快；含有30 g·L-1蔗糖的培养基利于LC生长和LHEC的形成；维生素C能较好的抑制继代培养中的褐变；BA有利于形成LC，而KT有利于紧密型愈伤组织的形成，同时BA处理的愈伤组织生长较KT处理的快；当2,4-D浓度为0.5～1 mg·L-1时，随着BA浓度的增加，LHEC的数量也随之增加，当BA为3 mg·L-1时，LHEC数量达到最大值100%。本文还对影响愈伤组织胚性化的主要因素进行了讨论。提出的各项建议对均质胚性愈伤组织LHEC的培养有重要的指导意义。

蔗糖；培养体系；无机盐；激素；胚状体

塔杨(Populus×canadensisMoench)是我国近年来新引进的杨树杂交品种，塔杨为加杨的一个变种，是从加杨品种中经过现代生物技术人工选育出的杨树新品种，属于黑杨派。……