时培文 ，白万富 ，周欢敏

（1.内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古自治区生物制造重点实验室，内蒙古 呼和浩特010018）

牛咽部组织结构的显微观察

时培文1，2，白万富1，2，周欢敏1，2

（1.内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古自治区生物制造重点实验室，内蒙古 呼和浩特010018）

［目的］运用组织学方法对3.5岁龄公牛咽部组织结构进行了观察与分析，以研究牛咽部不同部位显微结构。［方法］使用石蜡切片及HE和PAS染色在光学显微镜下观察牛咽部不同部位组织形态及细胞类型。［结论］牛鼻咽部黏膜层属于假复层柱状纤毛上皮结构，其间有大量的杯状细胞，没有角质层；喉咽部和口咽部属于复层扁平上皮结构，其间没有杯状细胞，有角质层。

牛；咽；HE染色；组织结构

牛咽部是其呼吸道和消化道上端的共同通道，上宽下窄，前壁自上而下分别与鼻腔、口腔和喉相通，病原体容易通过呼吸及进食引起感染，咽部引发的疾病很多，如慢性咽炎、由特异性病毒感染引起的咽结核、鼻咽癌、口蹄疫［1］等；咽壁分为黏膜层、肌层和外膜层，其中，黏膜层又分为黏膜上皮、固有层和黏膜下层，黏膜上皮由角质层、颗粒层、棘层和基底层构成［2］，其中，棘层与基底层被认为是病毒复制的主要位点。咽部又分为鼻咽部、喉咽部和口咽部［3］，对咽部结构的正确认识，是研究咽部疾病发病机制的基础［4］。目前，对牛咽部组织形态结构的显微观察研究较少，笔者从解剖及形态学角度研究牛鼻咽部、喉咽部及口咽部的组织形态及细胞类型，从而为牛咽部疾病的研究提供组织学依据。

1 材料与方法

1.1 材料 实验用牛咽部组织样品采自内蒙古自治区呼和浩特市北亚清真屠宰场，分别采集鼻咽部、口咽部、喉咽部样品若干，3.5岁龄，公牛。

1.2 制作石蜡切片 牛鼻咽部、口咽部、喉咽部组织样品分别用4%多聚甲醛液固定，清水过夜冲洗，经各级酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡，包埋，连续切片，厚度5 μm，HE及PAS染色，光镜观察。

2 结果

牛咽部形态学分析：从牛鼻咽部、喉咽部、口咽部样品中每隔5 μm取1张切片，每张切片取3个视野，光学显微镜下记录各个部位的结构，细胞的层数、上皮形态、上皮厚度及黏膜下腺体的形态等情况。

组织学观察标准：根据细胞的形态、组织结构及细胞的分化程度，牛咽部黏膜上皮分为2种类型的上皮。复层扁平上皮：主要分布于喉咽部及口咽部，细胞形状不一，紧靠基底膜的细胞为矮柱状；基底层以上为3～4层多边形细胞，再向上为5～6层扁平或梭型细胞，上皮与深层结缔组织的连接面凸凹不平，上皮外侧有角质层，游离面无纤毛存在。假复层柱状纤毛上皮结构：该种结构主要分布于鼻咽部，由柱状细胞、锥形细胞、梭形细胞和杯状细胞构成，其中以柱状细胞最为常见，表面有大量的纤毛。这些细胞形态各异，高矮不一，细胞核的位置不在同一水平线上，但基底部均附着于基膜。

2.1 鼻咽部结构显微观察 牛鼻咽部组织样品经HE及PAS染色后在光镜下观察，结果显示，黏膜层属于假复层柱状纤毛上皮结构（见图1a），其中分布有多种细胞，柱状细胞的表面具有纤毛，上层表面分布有大量明显的高脚杯状的杯状细胞［5］，在PAS染色中，这些细胞被染成红色［6］（见图1b），没有角质层，没有分泌腺，在黏膜层基底面与深部结缔组织之间可见明显的基膜。

图1 光镜下牛鼻咽HE染色（a）及PAS染色（b）结果（10×20）

2.2 口咽部结构显微观察 牛鼻咽部组织样品经HE及PAS染色后在光镜下观察，结果显示，黏膜层属于复层扁平上皮结构 （见图2a），细胞形态不一，没有杯状细胞，紧靠基膜的一层基底细胞排列紧密，为矮柱状，往上为梭形细胞，浅层为几层扁平细胞，浅层细胞比基底层细胞大，从基底层到浅层细胞核质比逐渐降低，黏膜层的最外部为一层角化的复层扁平上皮，在黏膜层中间分布有分泌腺，黏膜层与深部结缔组织连接凸凹不平。

图2 光镜下牛喉咽HE染色结果（a）及牛口咽HE染色结果（b）（10×20）

2.3 喉咽部结构显微观察 牛喉咽部组织样品经HE及PAS染色后在光镜下观察，结构与口咽部相似（见图2b），都为复层扁平上皮结构，没有杯状细胞，角质层比口咽部厚，黏膜层基底面与深部结缔组织之间没有明显的基膜，喉咽部和口咽部的黏膜层比鼻咽部厚。

3 讨论

该实验观察了牛咽部细胞的类型及形态分布。研究结果表明，牛鼻咽部黏膜层为假复层柱状纤毛上皮结构，在黏膜层外侧分布有大量杯状细胞，杯状细胞是黏膜上皮中的黏液分泌细胞，黏蛋白分泌后，与水结合形成黏液，有润滑和保护作用，在鼻咽部中的大量杯状细胞可以防止鼻咽部黏膜层受到损伤［7］。

在高倍镜下可以看到喉咽部和口咽部黏膜层浅层细胞为扁平梭型，在HE染色下细胞核被染成蓝色，黏膜层厚度大于鼻咽部，喉咽部及口咽部在形态上差别不大，黏膜层均为复层扁平上皮结构，该种结构具有较强的再生修复能力，对摩擦和损伤的耐受力较强。在鼻咽部黏膜层外层未观察到角质层，口咽部和喉咽部黏膜层外层有明显的角质层，并且喉咽部的角质层比口咽部的角质层厚，口咽部和喉咽部的角质层能抵御外界摩擦、防止液体外渗和化学物质渗入，能够有效保护内部的黏膜层、肌层及外膜层细胞。

在酒精逐级脱水过程中，发现鼻咽部脱水时间少于口咽部与喉咽部，透明时间也少于口咽部与喉咽部，透明时间过长会使包埋在石蜡块中的组织变脆，在后期切片过程中会难以得到完整的组织切片，在以后制作牛鼻咽部石蜡切片过程中应注意酒精逐级脱水时间与二甲苯透明时间。

该研究运用组织学方法研究了牛咽部的组织形态及细胞类型，为牛咽部疾病的研究提供了组织学依据。

［1］高闪电，独军政，周建华，等.口蹄疫病毒受体研究进展［J］.生物技术通报，2007（3）：67-71.

［2］刘斌.组织学与胚胎学［M］.北京：北京大学医学出版社，2005：30-32.

［3］孟运莲.现代组织学与细胞学技术［M］.武汉：武汉大学出版社，2004：27-28.

［4］陈茂怀，宗永生.鼻咽假复层纤毛柱状上皮核的形态定量学研究［J］.中华肿瘤杂志，1992，11（2）：87-89.

［5］史玉兰，段相林.杯状细胞的研究进展［J］.解剖科学进展，2001，7（4）：358-361.

［6］GRANT T D，SPECIAN R D.Proliferation of goblet cell and vacuolated cells in the rabbit distal coicn［J］.Arat Rec，1998，252（1）：41.

［7］张新民，宗永生，张汝逢，等.鼻咽柱状上皮中的细胞类型［J］.临床与实验病理学杂志，1986，2（2）：1-3.

（责任编辑：赵景娣）

Microscopic Observation of the Tissue Structure of Bovine Pharynx

SHI Pei-wen，BAI Wan-fu，ZHOU Huan-min
（1.College of Life Sciences，Inner Mongolia Agricultural University，Hohhot 010018，China；2.Inner Mongolia Biological Manufacturing Key Laboratory，Hohhot 010018，China）

In order to study the microstructure of different parts of the bovine pharynx,the histological structure of pharyngeal tissues of a 3.5-year-old bull was histologically observed.The bull pharynx tissue was collected and was used to prepare paraffin sections.The paraffin sections were subsequently stained using HE staining and PAS staining method to observe the tissue morphology and cell types of different parts of pharynx.Bovine nasopharynx mucosa layer belonged to pseudostratified columnar ciliated epithelium structure,among which,there were a large number of goblet cells but no cuticle;laryngopharynx and oropharynx belonged to stratified squamous epithelium structure,among which,cuticle was observed but goblet cells were absent.

bovine；pharynx；HE staining；histological structure

S858.232.16；Q954.5

A文章顺序编号：1672-5190（2016）02-0005-021，21，21，2

2016-01-19

时培文（1990—），男，硕士研究生，主要研究方向为生物学与生物技术。

周欢敏（1959—），男，教授，博士生导师，主要研究方向为生物学与生物技术。