李云海 陈丽华 刘艳

摘要 以云南龙竹的成熟种子为试验材料，采用75%酒精配合0.01%升汞作消毒灭菌剂，并设置0.01%升汞的不同消毒灭菌时间处理的对比。结果表明：在用75%酒精处理15 s后，再用0.01%升汞消毒灭菌处理，其适宜的消毒灭菌处理时间为3 h。在此消毒灭菌时间处理情况下，龙竹种子外植体的污染率已较低，为16.7%；而发芽率仍较高，可达到72.0%。

关键词 云南龙竹；组织培养；种子；外植体；灭菌

中图分类号 S795 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）06-0159-01

竹子因开花周期较长，且开花花期无法预测，种子获取十分困难。因此，采用组织培养技术，对竹子进行快速扩繁，是目前解决竹子种苗繁殖效率低问题的有效方法之一。在组织培养过程中，菌类污染是培养过程中常见且必须高度重视的问题，其污染来源一般可分为3类：第1类是材料带菌，第2类是接种污染，第3类是培养过程污染[1]。因而植物组织培养技术的基础是获得无菌材料，即有效解决材料带菌问题，理论上污染率应该控制在8%以内，但实际操作过程中，一般污染率会达到20%左右，甚至更高。再者，竹类植物与其他植物相比，竹子外植体的消毒灭菌则更困难，很难达到理想的灭菌效果，这可能与它的外在形态结构有关[2]。外植体表面消毒灭菌的关键就是要选择合适的消毒剂和消毒时间，同时还要兼顾消毒灭菌后外植体材料的存活率、生长状况等[3]。

很多学者对于竹子外植体的灭菌普遍采用的方式是以酒精（75%）与升汞（0.05%～0.20%）或次氯酸钠（0.5%～2.0%）配合使用，然后再根据不同的外植体材料情况进行不同时间的灭菌[4]。……