东北龙胆组织培养繁殖技术研究
2016-10-18李黎
李 黎
(1.黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室,哈尔滨150040)
东北龙胆组织培养繁殖技术研究
李黎
(1.黑龙江省科学院自然与生态研究所湿地与生态保育国家地方联合工程实验室,哈尔滨150040)
以东北龙胆的茎尖、茎段作为外植体,对其组织培养繁殖技术进行研究,结果表明:诱导不定芽分化的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,分化率可达96.7%,最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.3 mg/L,生根率可达97.5%,组培苗最适合的移栽基质为珍珠岩,移栽成活率可达90.0%。
东北龙胆;组织培养;激素;培养基
1 材料与方法
1.1试验材料
东北龙胆(Gentiana manshurica Kitag),为龙胆科多年生草本植物,以根及根茎入药[1,2],植株高25-60cm,花蓝紫色,花期8-9月份[3]。
1.2试验方法
1.2.1外植体消毒
将东北龙胆的茎尖、茎段放入清水中,加入少量洗衣粉浸泡搅拌2-3min,然后放入流水冲洗4-6h,在无菌条件下用75%酒精杀菌60s,再转入0.1%HgCl2中灭菌,灭菌时间分别为8、10、12min,然后用无菌水冲洗6-7次,接种于MS培养基上,一周后统计污染率(污染率=外植体污染数/外植体接种数×100%)。
1.2.2不定芽诱导
在MS培养基上调节6-BA和NAA的浓度,采用2因素3水平的正交设计,研究6-BA和NAA的9种不同组合,对不定芽分化的影响。每次接种30瓶,每瓶1株,每一处理设3次重复,其中6-BA含量为1.0、2.0、3.0mg/L共3个水平,NAA含量为0.1、0.2、0.3 mg/L共3个水平,共计9个处理。调节培养基的pH值在5.8-6.2之间,30d后统计分化率(分化率=外植体分化数/外植体成活数×100%)。
1.2.3根的诱导
将分化产生高约2.0-2.5cm的不定芽,转入生根培养基进行生根培养。试验方案如下:以MS和1/2MS为基本培养基,附加不同浓度的……
