液相色谱/串联质谱法测定芹菜中甲拌磷及其代谢物残留

2016-10-15赵志强

分析科学学报 2016年2期

吴成*，赵志强

(山东省农业环境保护和农村能源总站，山东济南 250100)

甲拌磷属高毒农药。我国食品安全国家标准(GB2763-2014)规定甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜之和为甲拌磷残留，蔬菜中最大残留限量为0.01 mg/kg[1]。国标法(GB/T19648-2006)包括甲拌磷和甲拌磷砜，不包括甲拌磷亚砜[2]。当前甲拌磷检测主要方法有：荧光光度法[3]、气相色谱法、气相色谱-质谱法[2,4]和气相色谱-串联质谱法[5]、液相色谱法[6]和液相色谱-串联质谱法(LC/MS/MS)[7]等；甲拌磷砜检测方法有气相色谱-质谱法[2,4]和气相色谱-串联质谱法[5]。芹菜是生产用药残留问题较多的蔬菜，本文用LC/MS/MS开展芹菜中甲拌磷及其代谢物残留检测的研究，建立了甲拌磷及其代谢物残留的快速确证检测方法。该法操作简单、快速、灵敏，精密度和回收率较好，适合芹菜中甲拌磷及其代谢物残留的确证和定量测定。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

LCMS-8040液相色谱-串联质谱仪(日本,岛津公司)，配电喷雾离子源(ESI)；LDZ5-2离心机(北京京立离心机公司)；k600食品加工机(荷兰,Philips公司)；IKA T18均质器(德国,IKA公司)。

甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜标准溶液(1 000 mg/L，农业部环境保护科研监测所)。用甲醇稀释甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜标准溶液成100 mg/L单标准储备液，置于-20.0 ℃冰箱中保存，使用时用甲醇-水(1+1)溶液稀释配制标准工作液。乙腈和甲醇(色谱纯，德国Merck公司)，甲酸、乙酸铵和氯化钠(分析纯，上海化学试剂有限公司)。实验用水为超纯水。

1.2 液相色谱/串联质谱条件

色谱柱：Waters symmetry C18柱(150×3.9 mm,5 μm)；柱温：40 ℃；流动相：甲醇-0.1%甲酸水溶液(含5 mmol/L乙酸铵)(体积比75∶25)；流速：0.4 mL/min；等度洗脱；进样量：1 μL；信号采集时长：10.0 min。电喷雾正离子源(ESI+)，接口电压：4.5 kV；电喷雾负离子源(ESI-)，接口电压：-3.5 kV；雾化气：3.0 L/min氮气；干燥气：15.0 L/min氮气；碰撞气：氩气；脱溶剂管温度：250 ℃；加热模块温度：400 ℃；扫描模式：多反应监测(MRM)；驻留时间：20 ms；延迟时间：3 ms；各监测离子对的质谱参数见表1。

表1 LC/MS/MS测定甲拌磷及其代谢物的部分参数

Note："*"referred to the qualitative ions."Q1" and "Q3" indicated the bias voltage in the pre rods of front and rear quadrupole of collision cell,respectively.“CE” meant collision cell voltage.“Relative intensity” referred to the signal intensity ratio of qualitative ion to quantitative ion.

1.4 样品前处理

按国标(GB/T 8855-2008)方法抽取芹菜样品，取可食部分[8]，缩分、切碎、混匀，放入食品加工机粉碎，制成待测样，置于-20.0 ℃冰箱中保存。称取样品15.0 g于50 mL具塞离心管，加30.0 mL乙腈，用均质器以12 000 r/min均质2 min，加5.0 g NaCl，剧烈震摇2 min，以5 000 r/min离心5 min，取上清液10.0 mL于100 mL烧杯中，60 ℃水浴氮吹至干，用1.0 mL甲醇-水(1+1)溶液溶解残渣，过0.22 μm尼龙膜，滤液待测。分别用气相色谱-质谱法[2]和本实验方法对购自市场的芹菜进行检测，选择不含甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜干扰的空白样作为实验对象。

2 结果与讨论

2.1 质谱条件的优化

分别采用ESI+和ESI-对甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜进行母离子扫描。结果发现：ESI+模式下，甲拌磷和甲拌磷亚砜的加氢峰离子([M+H]+)和甲拌磷砜的加铵峰离子([M+NH4]+)信号均较强且稳定，以相应离子作母离子，利用岛津LCMS-8040 Optimizer软件对甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜的子离子(Daughter ion)、四极杆预杆偏置电压(Q1和Q3)、碰撞池电压(CE)等参数进行优化，优化结果见表1。用优化的色谱质谱条件，在MRM模式下，进0.1 mg/L甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜混标1.0 μL，得总离子流图(TIC)见图1。依据欧盟2002/657文件规定的质谱技术中相对离子强度的最大允许限度范围，结合样品色谱峰保留时间和扣背景质谱图，可确证样品中甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜的存在。

2.2 线性范围和检出限

用芹菜空白基质液将甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜混合标准储备液配制成 0.01、0.02、0.04、0.06、0.08 和 0.1 mg/L系列标准工作液，以峰面积(y)对质量浓度(x,mg/L)做标准曲线，以3倍和10倍信噪比(S/N)计算方法检出限和定量限。其回归方程、线性范围及检出限等见表2。本方法检测灵敏度符合国标(GB2763-2014)对芹菜甲拌磷残留检测方法的要求。