姜翠凤， 王书平， 赵 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(滨州学院生命科学系，山东滨州 256603)



黄河三角洲2种菊科植物提取物及其复配的抑菌活性

姜翠凤， 王书平*， 赵 永， 王淑娟， 董 杰， 宿 斌

(滨州学院生命科学系，山东滨州 256603)

[目的]明确2种菊科植物的抑菌活性。[方法]以干苦菜、黄花蒿作为供试材料，大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌作为供试细菌，采用滤纸片法通过抑菌圈的大小研究干苦菜、黄花蒿及其复配提取液的抑菌活性。[结果]在供试浓度为0.1 g/mL时，2种植物的提取液及2种植物的复配混合液对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用，并且每1种植物提取液对至少1种菌的抑菌率大于70%，其中黄花蒿提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌率大于80%，苦菜提取液对大肠杆菌的抑菌率大于85%，苦菜与黄花蒿提取液的复配混合液对大肠杆菌的抑菌率约为100%。[结论]苦菜、黄花蒿有较好的抑菌活性，可进一步研究开发。

苦菜；黄花蒿；复配；抑菌效果

随着人类生活水平的提高，人们对周边食物的健康问题日益关注，植物农药也逐渐成为被关注的焦点。中国药学专家屠呦呦通过从青蒿中提取的青蒿素真正意义上造福人类。杨顺义[1]对14种植物的提取液进行了初步分析[1]。刘利本等[2]对蒲公英的抑菌作用进行了初步比较。近几年的生物仿制药逐步踏入高峰，赵自叶[3]对半胱氨酸蛋白酶IdeS进行了提高抗体结构的分辨能力研究。目前，关于苦菜、黄花蒿活性成分的研究已有报道[4]。笔者采用滤纸片法研究了干苦菜、黄花蒿对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌3种细菌的抑菌活性，旨在为植物源农药研究提供理论依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1供试植物。苦菜、黄花蒿：将采取的植物于烘箱内烘干，将所采取的植物粉碎，粉碎后采用水浴煮沸法获得提取液，粉碎后密封保存备用。

1.1.2供试菌种。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌菌种均由滨州学院生命科学系保藏。

1.2方法

1.2.1提取方法。

1.2.1.1苦菜(黄花蒿)水煮提取液的制备。称取干苦菜黄花蒿100 g于研钵中研磨至粉末状，去部分根，加入200 mL蒸馏水，浸泡过夜，微波低火煮沸20～30 min，滤纸过滤，重复2次，合并滤液，浓缩至100 mL，干苦菜(黄花蒿)含量终浓度为1 g/mL。过滤除菌， 4 ℃保存备用。

1.2.1.2干苦菜(黄花蒿)醇提提取液的制备。称取干苦菜(黄花蒿)100 g于研钵中研磨至粉末状，去部分根，用80%乙醇200 mL浸泡过夜，微波低火煮沸20～30 min，滤纸过滤，重复2次，合并滤液，浓缩至100 mL，干苦菜(黄花蒿)含量终浓度为1 g/mL。过滤除菌，4 ℃保存备用。

1.2.1.3复配溶液的制备。将抑菌效果较好的水提苦菜提取液和醇提黄花蒿提取液混合，获取复配溶液。

1.2.2最小抑菌浓度的检测。采用二倍稀释法。取带塞的试管，每种提取药液1列，每列11个试管，除第1个试管外其他试管加入2 mL无菌蒸馏水，第1的24管中药液加入4 mL，混匀后，吸取2 mL混合液加入第2管中，混匀后，再吸取2 mL混合液加入到第3管中，依次二倍稀释至第9管，第10管弃去2 mL；第10管作为生长对照，37 ℃培养24～36 h，以无细菌生长的最低浓度为最小抑菌浓度(MIC) 。

1.2.3抑菌圈测定试验。采用6 mm滤纸片法进行抑菌试验。配制普通琼脂培养基，121 ℃、0.1 kPa条件下灭菌20 min，待其冷却至80 ℃以下后，倒80个平板，每个浓度的1种提取方法的平板为4份，每份培养基上呈三角状放6 mm滤纸片若干，用移液枪移取每个浓度的药液提取液2 mL置上，37 ℃培养24 h左右，观察其结果，测定抑菌圈的大小，重复2～3次。

2　结果与分析

2.1最小抑菌浓度的测定结果由图1可知，苦菜、黄花蒿提取液对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度均在10%以下，黄花蒿对大肠杆菌的抑菌效果较小，达2.5%，而干苦菜的最小抑菌浓度则为3.9%；干苦菜对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度较大，达7.8%。说明黄花蒿与干苦菜对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌均有较强的抑菌作用。

2.2抑菌浓度的测定结果[5]由表1可知，苦菜与黄花蒿的提取液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有抑菌作用。苦菜水提取液对大肠杆菌的作用较强烈，抑菌圈直径达9.498 mm，黄花蒿醇提液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用较强，抑菌圈直径达10.833 mm，而黄花蒿和苦菜复配混合液的抑菌作用更强，抑菌圈平均直约10 mm。

图1　2种菊科植物的MICFig.1　MIC of two Compositae plants

3　结论

苦菜、黄花蒿的提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有抑菌效果，并且抑菌率在70%以上。苦菜的水提取液比醇取提液的抑菌作用较强，黄花蒿的醇提液比水提液的抑菌作用较强，但是苦菜和黄花蒿的复配混合液抑菌效果较苦菜、黄花蒿提取液分别抑菌作用更强。该试验结果为今后关于苦菜、黄花蒿的研究奠定了基础。

表1　苦菜不同加工方法制备药液的抑菌效果

[1] 杨顺义.苍耳、狼毒等植物提取物抑菌活性的初步研究[D].兰州：甘肃农业大学，2003.

[2] 刘利本,平家奇,高海飞,等.蒲公英不同部位提取物体外抑菌作用的比较[J].延边大学农学学报,2010(1):65-68.

[3] 赵自叶.半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表达、纯化、活性鉴定及应用[D].聊城：聊城大学，2014.

[4] 吴静.黄花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分离研究[D].重庆：西南大学，2008.

[5] 史冬燕.菏泽地区2种菊科植物的抑菌作用研究[J].安徽农业科学，2009,37(17):7986-7987.

The Antibacterial Activity of 2 Compositae Extracts and Compound in the Yellow River Delta

JIANG Cui-feng, WANG Shu-ping*, ZHAO Yong et al

(Department of Life Science, Binzhou University, Binzhou, Shandong 256603)

[Objective] The aim was to determine the antibacterial activity of 2 Compositae plants.[Method] With maror, annua as test materials,Escherichiacoli,BacillussubtilisandStaphylococcusaureusas tested bacterias, using filter paper method, the antibacterial activity of maror and annua and their composite liquids were analyzed by observing the size of inhibition zone.[Result] The results showed that: when the concentration was 0.1 g/mL, the intermixtures and composite liquids of both plants inhabited three bacterias above, and the inhibitory rate of each plant’s concentration was more than 70% at least, the rate of annua inhibitingStaphylococcusaureuswas more than 80%, the rate of maror inhibitingEscherichiacoliwas more than 85%, the compound liquid of maror, annua can inhabitEscherichiacolithoroughly, which means the inhibitory rate was 100%.[Conclusion] Maror and annua have good antibacterial activity, which can be further studied and developed.

Maror; Annua; Compound formulation; Bacteriostat

国家级大学生创新项目(201510449033)；滨州学院校内青年基金项目(BZXYL1307)。

姜翠凤(1995- )，女，山东寿光人，本科生，专业：生物技术。*通讯作者，硕士，从事微生物学研究。

2016-07-01

S 482

A

0517-6611(2016)24-121-02