沈海燕，张春红，刘志成，孙俊颖，卢　宇，张建峰*

(1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验，广东广州 510640；2.国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014)



RNA干扰抑制ST细胞Ⅰ型干扰素受体-2表达的研究

沈海燕1△，张春红1△，刘志成1，孙俊颖1，卢宇2，张建峰1*

(1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验，广东广州 510640；2.国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014)

应用RNA干扰技术建立猪睾丸(ST)细胞Ⅰ型干扰素受体-2(IFNAR-2)基因knock down模型。采用FuGENE HD转染剂将pSiCMVE1、pSiCMVE2和pSiCMVE3干扰载体分别转染ST细胞，经荧光定量PCR和Western blot分别检测IFNAR2 mRNA和蛋白水平表达变化。结果显示，与对照组比，转染干扰载体组均可明显降低IFNAR2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。RNA干扰技术能够有效抑制IFNAR2基因的表达，为进一步研究IFNAR2基因的生物学功能提供可靠的手段，为研究IFNAR2在病毒感染中的作用奠定基础。

RNA干扰；ST细胞；Ⅰ型干扰素受体-2

干扰素(inteferon，IFN)发挥其抗病毒的生物效应需要与相应的信号受体结合，引发级联信号放大过程，将信号传递到细胞核内，调控一系列基因表达相应抗病毒蛋白，进而发挥抗病毒作用[1-2]。干扰素受体是干扰素连锁反应的初始蛋白[3-4]。根据IFN的分类，IFN受体分为结合Ⅰ型IFN的Ⅰ型IFN受体和结合Ⅱ型IFN的Ⅱ型IFN受体。人Ⅰ型IFN受体(type Ⅰ interferon receptor，IFNAR)分布在细胞表面，由2个亚单位组成，分别为α(IFNAR-1)和β(IFNAR-2)[5]。IFN-α/β通过吸附细胞表面受体IFNAR-1和IFNAR-2发挥作用，蛋白酪氨酸激酶中的Tyk2和Jak1分别与IFNAR-1和IFNAR-2相关[6]。目前对IFNAR的分子结构基本弄清，但IFNAR的研究则处于起步阶段，IFNAR很多问题仍亟待解决，例如IFNAR在信号通路中发挥的作用、如何发生磷酸化、与IFN结合的位点等等，这些问题的解决有利于IFNAR的相关研究。……