小麦5DL上基于SNP序列的新SSR标记的开发
2016-09-29陈芳李文静邓志英田纪春陈建省
陈芳,李文静,邓志英,田纪春,陈建省
作物生物学国家重点实验室;山东省作物生物学重点实验室、小麦品质及分子育种研究室,山东泰安271018
小麦5DL上基于SNP序列的新SSR标记的开发
陈芳,李文静,邓志英*,田纪春*,陈建省
作物生物学国家重点实验室;山东省作物生物学重点实验室、小麦品质及分子育种研究室,山东泰安271018
本文旨在利用粗山羊草的物理图谱及其基因组序列数据库开发普通小麦5DL上Xbarc320-Xwmc215区段与SNP紧密连锁的SSR标记(SNP-SSR)。对AT5D4910-AT5D5010之间的90个SNP位点进行了序列延伸和本地Blast,利用SSRHunter软件查找SNP位点附近的SSR位点,并利用Primer5设计引物。结果共发现109个SSR位点。对其中的72个位点设计引物,得到了47个5DL上Xbarc320-Xwmc215区段的SNP-SSR标记。对新开发的标记,利用22个小麦品种及人工合成小麦材料、中国春缺体四体及DH群体进行了有效性、多态性的检测及染色体定位。结果表明,这些标记均能扩增出稳定清晰的带型,并且均定位与小麦5D染色体上;其中四个标记Xtdc11、Xtdc31、Xtdc38、Xtdc44整合到了豫麦57与花培3号群体的5DL图谱上。
SNP-SSR;标记开发;小麦5D染色体
小麦A、D基因组测序工作的初步完成[1,2]及D基因组物理图谱的构建[3]为开发物理位置确定的SSR标记提供了帮助。小麦上很多重要的性状都定位在5DL上Xbarc320-Xwmc215区段附近,可知该区段存在十分重要的基因。因此,开发此区段的标记对进一步精细定位及克隆[4,5]、种质资源多样性检测[6-8]和分子辅助育种[9,10]等具有重要的作用和意义。
小麦是异源六倍体,基因组结构复杂,每个基因组上存在的分子标记的密度也有较大差异。……