荧光染色法与KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用比较
2016-09-28韩德忞刘原志朱均昊李莉章强强
中国真菌学杂志 2016年4期
韩德忞 刘原志 朱均昊 李莉 章强强
(复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海 200040)
·技术与方法·
荧光染色法与KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用比较
韩德忞刘原志朱均昊李莉章强强
(复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室,上海 200040)
目的探索一种结果更可靠的真菌直接镜检方法。方法对600例临床高度疑似真菌感染的标本分别采用荧光染色法和KOH湿片法进行真菌直接镜检。结果荧光染色法和KOH湿片法的真菌检出率分别为97%和88.5%。结论 荧光染色法是一种适合临床的、快速有效的真菌镜检方法。
KOH湿片法;真菌直接镜检;真菌荧光染色法;真菌感染
[Chin J Mycol,2016,11(4):240-242]
直接镜检法旨在通过显微镜和简单的试剂(通常1种)的帮助观察标本中的真菌结构。在真菌实验室中常规采用KOH湿片法观察标本中有无真菌有形成分,本实验采用荧光染色法与KOH湿片法分别对同一标本同时作镜检,比较两种方法在镜下的真菌形态的辨别清晰度与敏感性。
1 材料和方法
1.1荧光染色液的成分与染色原理
荧光染色液的成分我们采用的莱芙特敏真菌荧光染色液配有荧光染色A液及染色B液。其中荧光染色A液是一种含有特殊荧光素标联的几丁质酶的复合溶液,其中添加了浓度为10%的氢氧化钾有助于溶解皮屑及甲屑标本中的角质细胞。染色B液是一种含有伊文思蓝染料的溶液,用于去除视野中杂质荧光的干扰。
染色原理一般细胞荧光素会与各类标本中真菌细胞壁的(1,3)-β-D葡聚糖结合,从而通过荧光标记进行真菌检测。……
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