王 艳，张小文，王 政，邱 璐

（1. 上海出入境检验检疫局，上海 200135；2. 山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心，青岛 266002；3. 上海市浦东新区农产品安全检测中心，上海 201202）

·研究论文·

三种马源病原体三重实时荧光定量PCR检测方法的建立

王 艳1，张小文2，王 政3，邱 璐1

（1. 上海出入境检验检疫局，上海 200135；2. 山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心，青岛 266002；3. 上海市浦东新区农产品安全检测中心，上海 201202）

通过对GenBank中马鼻疽伯克霍尔德氏菌（Burkholderia mallei）、亨德拉病毒（Hendra virus，Hev）和西尼罗热病毒（West nile virus，WNV）的主要基因进行分析比较，分别设计合成了引物和TaqMan 荧光探针，对反应条件和试剂浓度进行优化，建立了能同时检测这3种病原的三重实时荧光定量PCR方法。本研究建立的三重荧光定量PCR具有良好的特异性、敏感性和重复性，适合于大批量样品的检测，可广泛用于出入境马匹这3种病原体的检疫。

马鼻疽伯克霍尔德氏菌；西尼罗热病毒；亨德拉病毒；实时荧光定量PCR

西尼罗病毒（West nile virus，WNV）属于黄病毒科、黄病毒属，主要通过蚊媒传播，1937年首次被分离［1，2］。WNV被认为在蚊-鸟-蚊的传播循环过程中增殖，多数种类的鸟类和蚊类都支持病毒的复制，而且大部分鸟类在感染后并不出现明显的症状［3，4］。人和马被认为是WNV的终端宿主。目前报道的WNV爆发都源自WNV的I型病毒。哺乳动物感染WNV后可出现不同程度和不同症状的临床表现，严重的可影响神经系统，引起西尼罗脑炎。

亨德拉病毒（Hendra virus，HeV）是一种新型人畜共患病病毒，主要感染人和马。HeV感染首次暴发于1994年澳大利亚昆士兰州布里斯班郊区的亨德拉镇，14匹赛马出现严重的急性呼吸道疾病，最终全部死亡，并有2人感染死亡。……