何世成，邹玖零，王卫国，王昌建，唐小明，林 源，鲁杏华，邱立新

（1.湖南省动物疫病预防控制中心，长沙 410014；2.永州市动物疫病预防控制中心，永州 425000）

·研究论文·

小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒双重荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立

何世成1，邹玖零2，王卫国1，王昌建1，唐小明1，林 源1，鲁杏华1，邱立新1

（1.湖南省动物疫病预防控制中心，长沙 410014；2.永州市动物疫病预防控制中心，永州 425000）

对GenBank中的小反刍兽疫野毒（Peste des petits ruminants virus，PPRV）及疫苗毒株的基因序列进行分析，设计两对引物和两条特异探针，建立小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒株的双重荧光RT-PCR鉴别检测方法。特异性检测表明，建立的双重荧光RT-PCR方法，可特异检测野毒（FAM通道）和疫苗毒（VIC通道）。灵敏度实验表明，FAM通道可检测到10-5稀释度的RNA （3.576 ng/mL），VIC通道可检测到10-3稀释度的RNA（27.6 ng/mL）。重复性实验表明，该双重荧光RT-PCR方法重复性较好。用建立的二重荧光RT-PCR方法对20份组织样品进行检测，结果显示，该方法可以有效区分野毒和疫苗毒株，且野毒检测结果与实验室确诊阳性结果一致，可以用于临床检测。

小反刍兽疫病毒；野毒；疫苗毒；荧光RT-PCR；鉴别

小反刍兽疫（Peste des petits ruminants，PPR）是一种烈性、高度接触性传染病，该病危害严重，是需要采取强制预防、控制、封锁、扑杀的Ⅰ类动物疾病［1］。PPR由副粘病毒科、麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒（Peste des petits ruminants virus，PPRV）引起，主要感染小反刍兽，特别是绵羊和山羊，不感染人。PPR 可通过多种方式传播，排泄物、污染物、气溶胶等都可以成为传染源［2］，发病率和死亡率分别可达到100%和90%，若继发感染其他疾病，死亡率可达到100%［3］。……