朱小甫，吴旭锦

（咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所 动物疫病分子生物学诊断实验室，咸阳 712000）

·研究论文·

鉴别伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗毒与野毒套式PCR方法的建立

朱小甫，吴旭锦

（咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所 动物疫病分子生物学诊断实验室，咸阳 712000）

为建立一种能够鉴别伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗毒与野毒套式PCR方法，根据GenBank上发表的伪狂犬病毒gD、gE基因序列，设计并合成了4对引物，对反应体系和条件进行优化，建立复合套式PCR方法。通过灵敏性试验、特异性试验、病料中PRV检测对比等方法验证建立方法的适用性。结果表明，该方法检测的极限为2.78×10-4pg/L，并且仅能从PRV野毒株扩增出354、217 bp目的条带，PRV疫苗扩增出了217 bp单条带，其他5种常见感染猪的病毒均为阴性。

伪狂犬病毒；gD基因；gE基因；鉴别诊断；套式PCR

伪狂犬病（pseudorabies，PR）又名奥叶兹基氏病，是由疱疹病毒科（Herpesvirdae），α-疱疹病毒亚科（Alpherpesvirinae）中的伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）感染引起的一种或多种动物感染的急性传染病，迄今仍是我国主要的猪群传染病之一［1］。PRV可引起怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎；新生仔猪衰竭死亡，死亡率可达100%；成年猪多呈隐性感染，长期带毒排毒，危害巨大［2］。在我国，自1984年刘永纯首次报道伪狂犬病后，迄今为止已有20多个省份相继发生该病，给我国的养猪业特别是集约化养猪造成了巨大经济损失［3］。

随着分子生物学技术的飞速发展，PCR技术以其快速、敏感、易于操作等优点在动物疫病诊断中得到了广泛应用［4-6］。Harding等［7］针对gD基因设计引物，改进了PRV PCR检测方法。……