于周璐，滕巧泱，崔宏锐，荣广玉，李雪松，杨健美，陈鸿军，李泽君

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241）

·研究论文·

一种共表达不同亚型禽流感病毒基因且形成病毒样颗粒的真核表达载体的构建与鉴定

于周璐，滕巧泱，崔宏锐，荣广玉，李雪松，杨健美，陈鸿军，李泽君

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海200241）

动物流感DNA疫苗是非常有应用前景的新型疫苗之一，本研究构建了能同时表达禽流感病毒2种血凝素H5HA和H9HA以及1种神经氨酸酶N1NA的真核表达质粒。间接免疫荧光结果表明，构建的真核表达质粒转染MDCK细胞后，同时表达出H5HA、H9HA和N1NA蛋白；转染293T细胞上清通过血凝试验可检测到24血凝价；通过透射电镜观察到了病毒样颗粒。本研究用一种质粒同时表达不同亚型流感病毒蛋白并且形成了病毒样颗粒，为流感病毒多价DNA疫苗研究提供了坚实基础。

禽流感；病毒样颗粒；H5HA；H9HA；N1NA

禽流感（avian influenza，AI）是由A型禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）引起的呼吸道系统和全身性疾病为临床特征的禽类烈性传染病的总称。禽流感病毒属于正粘病毒科、流感病毒属，为多形态、有囊膜、单股负链、分节段的RNA病毒。其中血凝素（hemagglutinin，HA）和神经氨酸酶（neuraminidase，NA）是禽流感病毒粒子的主要表面抗原，在禽流感病毒样颗粒的包装及释放过程中起主要作用，并且能够诱导免疫保护的作用。

2016年H5、H9亚型禽流感在世界范围的蔓延爆发，给当地家禽养殖业带来了巨大的经济损失，这使得对于H5、H9亚型禽流感疫苗的研制迫在眉睫。流感病毒样颗粒是研究病毒包装及出芽等生物学机制的手段，也是流感病毒新型疫苗开发的突破口［1-7］。……