周良云，刘谈，王升，唐金富，康利平，郭兰萍

(中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地，北京 100700)

实时荧光定量PCR研究进展及其在中药领域的应用△

周良云，刘谈，王升，唐金富，康利平，郭兰萍*

(中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地，北京 100700)

实时荧光定量PCR(Real-Time PCR or qRT-PCR)是一种在PCR反应体系中加入荧光物质，利用荧光信号对整个PCR进程进行实时监测，从而达到对未知起始模板进行定量分析的方法。该技术具有操作简单、方便快捷、灵敏度高、特异性强、动力学范围宽、污染率低等优点，被广泛应用于核酸定量等分析中。本文对实时荧光定量的基本原理、定量类型及其在中药领域中的应用作一综述。

实时荧光定量PCR；中药领域；应用

1993年，Higuchi等人将PCR技术和封闭式检测相结合，对目的核酸数量进行定量分析，提出了荧光定量PCR技术的概念。1995年美国PE公司成功研制了TaqMan技术，1996年又推出了首台荧光定量PCR检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，并使用Ct值进行分析，达到定量核酸的目的，自此Real-Time PCR技术才得以真正的推广和应用。到目前为止，实时荧光定量已被广泛应用于基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等科学领域。

1 原理

Real-Time PCR是在PCR反应体系中加入荧光物质，利用荧光信号对整个PCR进程进行实时监测，从而达到对未知起始模板进行定量分析的目的。它是一种将酶动力学、核酸扩增、光谱分析和实时检测技术相结合的技术。随着PCR反应的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。……