周　健,余天雾△,吕永双,蒋小卫

(1.重庆医科大学附属永川医院普通外科3病区　402160;2.重庆医科大学附属第二临床学院三腺外科　400010)



论著·基础研究

miR30a体外干预乳腺癌腋窝肿大淋巴结中肿瘤干细胞相关基因表达和侵袭力的变化*

周健1,余天雾1△,吕永双1,蒋小卫2

(1.重庆医科大学附属永川医院普通外科3病区402160;2.重庆医科大学附属第二临床学院三腺外科400010)

目的探讨肿瘤干细胞在乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中微转移灶及微小RNA30a(miR30a)对其侵袭能力的影响，初步探讨miRNAs抗乳腺癌治疗的可行性。方法从乳腺癌患者腋窝肿大淋巴结中分离、培养肿瘤干细胞样乳腺癌细胞。合成 miR30a 寡核苷酸片段，应用腺病毒将该片段转染人原代乳腺癌细胞，同时设乳腺癌MDA-MB-231细胞株为试验对照，每组细胞均设空载体组、空白对照组，以荧光显微镜评估转染效率。以 Transwell 小室体外侵袭试验检测转染前后肿瘤细胞增殖和侵袭力的变化。以Western blot分别检测ALDH1、Vimentin和N-Cadherin蛋白表达。结果Transwell小室体外侵袭试验显示空白对照组中原代乳腺癌细胞较 MDA-MB-231 细胞株侵袭力强，其侵袭指数分别为(75.3±3.2)%，(58.4±2.8)%，两者差异有统计学意义(P<0.05)，而转染miR30a后这两种细胞体外侵袭力均明显减弱，其侵袭指数分别为(21.4±1.9)%,(28.2±2.3)%，与各自空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者部分腋窝增生肿大的淋巴结中ALDH表达增高，可能存在肿瘤微转移，术中应完全清扫为宜。miR30a抑制了肿瘤干性基因表达和侵袭能力。

乳腺肿瘤；干细胞；腋窝肿大淋巴结；肿瘤转移；侵袭；miR30a

乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells)可能是乳腺癌术后局部复发和转移的关键因素[1]。对其鉴别主要是基于肿瘤细胞表面的分子表型如CD44+/CD24-/low或乙醛脱氢酶1阳性(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)[2]。

乳腺癌细胞出现上皮细胞向间质细胞转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT) 是上皮细胞获得侵袭、迁移能力的主要方式。因此，研究乳腺癌腋窝淋巴结微转移灶及寻找针对乳腺癌干细胞的有效措施具有重要意义。……