宋林林，王晓红，姜　博，赵　毅，王　祥，穆　杨*

(1.西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100；2. 陕西省动物疫病预防控制中心，陕西西安710016；3. 北京市顺义区张镇兽医卫生防检站，北京 101307)



猪传染性胃肠炎病毒陕西分离株S蛋白抗原位点的真核表达

宋林林1，王晓红1，姜博1，赵毅2，王祥3，穆杨1*

(1.西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100；2. 陕西省动物疫病预防控制中心，陕西西安710016；3. 北京市顺义区张镇兽医卫生防检站，北京 101307)

猪传染性胃肠炎(TGE)是严重危害全世界养猪业健康发展的一种高度传染性病毒病，其病原猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S蛋白携带有主要的B淋巴细胞识别的抗原决定簇，是诱导机体产生保护性中和抗体的主要抗原。本研究以提取的TGEV 陕西分离株感染的ST细胞的RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增编码S蛋白上包含C、B、D、A 4个抗原位点的基因片段，将目的片段连接到真核表达载体pcDNA3.1/V5-HisB上，构建重组表达载体，转染293T细胞后，通过Western blot检测目的基因的表达。结果成功克隆到编码S蛋白C、B、D、A 4个抗原位点的基因片段，以TGEV阳性猪血清和抗His标签单抗的Western blot结果均显示，目的基因在293T细胞中获得表达。本研究为TEG核酸疫苗的研制奠定了基础。

猪传染性胃肠炎病毒；S基因；抗原位点；真核表达

猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病，不同年龄和品种的猪均易感，尤其哺乳仔猪最易感[1]。主要表现为呕吐、腹泻、脱水症状[2-3]，严重危害着全世界养猪业的健康发展。TGEV属于冠状病毒科冠状病毒属，是引起肠道疾病的主要原因[4]，病毒耐低pH环境，可在易感动物小肠绒毛上皮细胞中复制，造成细胞变性、绒毛缩短等从而导致吸收障碍和腹泻。……