薏苡仁油对HCT116细胞血管生成拟态形成的影响及机制*
2016-09-20吕秀玮贺文煜袁昌劲
余 涛, 刘 礼, 吕秀玮, 贺文煜, 袁昌劲
华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院中西结合肿瘤科,武汉430014
薏苡仁油对HCT116细胞血管生成拟态形成的影响及机制*
余涛,刘礼,吕秀玮,贺文煜,袁昌劲△
华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院中西结合肿瘤科,武汉430014
目的观察薏苡仁油(CLSO)对人结肠癌HCT116细胞血管生成拟态形成能力的影响,并观察CLSO对细胞迁移能力和迁移诱导蛋白-7(Mig-7)表达水平的影响,藉此探讨CLSO影响血管生成拟态形成的可能机制。方法MTT法检测CLSO对HCT116的无毒浓度(增殖抑制率<10%时的浓度),选取无毒浓度以下不同浓度的CLSO作用于三维培养的HCT116细胞,观察其对HCT116细胞形成血管生成拟态的影响;并用划痕实验观察各组细胞的迁移能力,蛋白印迹法检测各组中Mig-7蛋白的表达水平。结果体外三维培养环境下,经CLSO作用的HCT116细胞形成血管生成拟态的结构比对照组减少。划痕实验中对照组、CLSO 5和10 μL/mL浓度组的平均迁移距离依次缩小,迁移率分别为17.07%、9.19%、2.10%,2个实验组和对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白印迹法检测显示经不同浓度CLSO作用于HCT116细胞后实验组条带灰度值/内参条带灰度值的比值比对照组小,Mig-7蛋白表达受到抑制,其中10 μL/mL浓度组的抑制作用比5 μL/mL组更明显,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论CLSO体外对HCT116形成血管生成拟态的能力存在抑制,其机制可能与下调Mig-7蛋白表达,从而影响细胞的迁移能力有关。
薏苡仁油;结肠癌;血管生成拟态;细胞迁移;迁移诱导蛋白-7
薏苡仁油(coix seed oil,CLSO)是从中药薏苡仁中提取的脂质成份。前期临床研究表明该药对肠癌有效,具体作用表现在抗炎消肿[1],抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡[2],辅助化疗减毒增效[3],减少放疗造成的组织损伤[4]以及调整免疫功能[5]等方面。而抑制肿瘤血液供应也是抗肿瘤治疗的重要策略,但是关于CLSO影响肿瘤血供的研究却较少。目前发现有内皮血管和血管生成拟态2种管道为肿瘤提供血液[6]。前期研究发现CLSO可以影响肿瘤内皮血管生成[7],其机制与CLSO影响血管内皮细胞增殖和VEGF表达有关[8]。本实验则是以人结肠癌细胞株(HCT116)为研究对象,观察CLSO对血管生成拟态的影响。由于肿瘤细胞迁移是血管生成拟态形成过程中的必要环节,而迁移诱导蛋白-7(migration induced protein-7,Mig-7)是调控血管生成拟态的关键分子[9],本实验中同时观察CLSO对细胞迁移能力和Mig-7表达的影响,旨在进一步探讨CLSO抑制血管生成拟态的可能机制。……