吴　静，赵润鹏，徐雪维，王　婉，杨小康，胡　东

(1.安徽理工大学医学院免疫与检验教研室，安徽　淮南　232001；2. 安徽理工大学免疫与感染研究所，安徽　淮南　232001)



鸡六种病毒多重PCR检测方法的建立和应用

吴静1,2，赵润鹏1，徐雪维1，王婉1，杨小康1，胡东1,2

(1.安徽理工大学医学院免疫与检验教研室，安徽淮南232001；2. 安徽理工大学免疫与感染研究所，安徽淮南232001)

禽流感(Avian influenza, AI)、鸡新城疫(Newcastle disease, ND)、鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis, IB )、鸡传染性喉气管炎( Infectious laryngotracheitis, ILT)、鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)和鸡减蛋综合症(Egg drop syndrome 76,EDS-76)是6种常见的禽类病毒性传染病，给养鸡业造成重大经济损失。依据NCBI核酸数据库中禽流感病毒(Aiv)、新城疫病毒(Ndv)、鸡传染性支气管炎病毒(Ibv) 、传染性法氏囊病(Ibdv)、鸡传染性喉气管炎病毒(Iltv)及减蛋综合征病毒(Edsv)基因序列, 设计了6对特异性引物, 建立并优化针对鸡Aiv、Ndv、Ibv、Ibdv、Iltv和Edsv的多重PCR鉴别诊断方法, 同时进行现场检测应用。结果显示该多重PCR体系检测限为100fg，与其他常见病原体无交叉反应。研究表明鸡六种病毒多重PCR方法具有较高敏感性与特异性，在禽类常见病毒现场诊断方面具有广阔的应用前景。

多重PCR; 禽流感病毒; 新城疫病毒; 鸡传染性支气管炎病毒; 鸡传染性喉气管炎病毒

禽流感( Avian influenza, AI)、鸡新城疫( Newcastle disease, ND)、鸡传染性支气管炎( Infectious bronchitis, IB )、鸡传染性喉气管炎( Infectious laryngotracheitis, ILT)、鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)和鸡减蛋综合症(Egg drop syndrome 76,EDS-76)是6种常见的禽类病毒性传染病，给养鸡业造成重大经济损失[1-3]。早期快速诊断对于控制疫情具有重要意义。多重PCR能够同时检测多种病原体，可对混合感染进行鉴别诊断，并且较之于血清学诊断、病原分离鉴定等常规诊断方法，具有快速高效，灵敏度高的优势。……