王学成 马 萌 吴煜琪 牛学英 张亚平 王晓冬 陈 雪*

1(南通大学医学院组织学与胚胎学系， 江苏 南通 226001)2(南通大学附属医院血液内科，江苏 南通 226001)

人Muse细胞体外诱导为神经前体细胞的研究

王学成1马 萌1吴煜琪1牛学英1张亚平2王晓冬1陈 雪1*

1(南通大学医学院组织学与胚胎学系， 江苏 南通 226001)2(南通大学附属医院血液内科，江苏 南通 226001)

探讨成人骨髓来源的Muse细胞体外诱导为神经前体细胞的技术方法。从健康成人骨髓中分离出骨髓基质细胞(hBMSCs)，利用流式细胞分选技术从中筛选出Muse细胞，采取免疫荧光细胞化学染色和qPCR技术鉴定Muse细胞的多能干细胞特性；通过神经诱导培养基体外诱导Muse细胞分化为神经前体细胞(Muse-NPCs)，采用免疫荧光细胞化学染色和qPCR技术鉴定其神经干细胞标志物表达情况。从hBMSCs中分选出约0.58%的Muse细胞，Muse细胞表达多能干细胞标志物SSEA-3、Nanog和Oct4，其mRNA表达水平均高于hBMSCs(P<0.01)；诱导后的Muse-NPCs表达神经干细胞标志物Nestin、βIII-tubulin，其mRNA表达水平均高于hBMSCs及Muse 细胞(P<0.01)。从成人骨髓中成功分离出具有多能干细胞特性的Muse细胞，用体外诱导形成Muse-NPCs，可为今后细胞治疗修复神经损伤提供新的种子细胞。

Muse细胞；神经前体细胞；流式细胞仪分选术；骨髓

引言

神经系统损伤后神经元与神经胶质细胞大量死亡，仅存的极少量神经干细胞无法足量补充丢失的神经组织细胞，且受损的神经元再生能力也相对较弱，因此有必要对其进行细胞治疗[1-3]。干细胞因其具有多向分化和自我复制能力，被广泛应用于神经系统损伤的细胞治疗中。目前，已报道的干细胞种类较多，但都有各自的局限性。

1)成体定向干细胞：分化能力较为局限，难以实现跨胚层分化，而神经干细胞(neural stem cells，NSCs)本身取材较为困难[4-5]。

2)胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)：是能诱导分化为机体几乎所有细胞类型的全能干细胞，但由于伦理学问题和致瘤性而备受争议[6-7]。……