王吉明，尚建立，李 娜，马双武，徐永阳

（中国农业科学院郑州果树研究所 郑州 450009）

DNA是遗传物质的重要信息载体，DNA提取的数量及质量与PCR扩增、限制性酶切、Southern杂交、测序等分子生物学研究密切相关[1]。在西瓜研究中通常从真叶中提取DNA[2-4]，以满足SSR、SRAP等分子标记的需求。西瓜种子是最常见和易获得的样品材料之一，但很少直接用于DNA提取，仅国外有从西瓜种子中提取DNA的报道[5]。在实际研究和工作中为了提高效率，可能需要对现有的特定类型西瓜样品进行DNA提取，如进行种子纯度分子标记检测时，若能从种子样品中提取DNA，而不必播种育苗后从真叶提取DNA，可以缩短鉴定时间1周以上，对于快速实现种子纯度检测具有重要意义。为此笔者以西瓜种子、下胚轴、子叶、种芽（下胚轴+子叶）、新鲜真叶和干燥真叶6种不同类型样品为试验材料，比较不同类型样品的DNA提取数量和质量，并对提取的DNA进行dCAPS扩增和酶切，判断不同类型西瓜样品中提取的DNA在分子生物学研究中的应用价值，为合理利用西瓜样品材料提供研究依据。

1 材料与方法

1.1 材料

试验于2016年3—7月在中国农业科学院郑州果树研究所进行，以来自国家西瓜甜瓜中期库的西瓜种质资源父本‘14CB11’（感枯萎病）、母本‘Sugarlee’（抗枯萎病）及杂交F1为研究材料，种子经过25℃清水浸种24 h后用棉布包裹，于32℃条件下恒温催芽48 h，然后播种于营养钵中育苗，取催芽前备份的单粒种子，以及催芽或育苗后的下胚轴、种芽（下胚轴+子叶）、子叶、新鲜真叶各0.05 g为材料，另取0.05 g新鲜真叶置于国家西瓜甜瓜中期库种质保存冷库中（5℃，40%相对湿度）放置72 h后脱水为干燥真叶，一起用于DNA提取研究。……