刘莹莹，翁仕强，卢 瑛，赵 勇，潘迎捷（上海海洋大学食品学院，上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心，上海201306）

基于TLH重组蛋白单抗的磁性免疫层析试纸条构建

刘莹莹，翁仕强，卢 瑛*，赵 勇，潘迎捷
（上海海洋大学食品学院，上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心，上海201306）

为了检测不耐热溶血毒素TLH，以His-TLH重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术制备TLH单克隆抗体，然后将纯化后的单抗与磁珠偶联制备免疫磁珠，以此免疫磁珠为标记物构建了TLH重组蛋白的磁性免疫层析检测试纸条。结果表明，该磁性免疫层析试纸条实现了TLH重组蛋白的快速定性和定量检测，具有快速、操作简便、灵敏度高（检测限12.5 ng/mL）等特点。本研究所构建的磁性免疫层析试纸条为重组溶血毒素的快速鉴定、诊断和检测提供了一种新途径。

副溶血性弧菌；不耐热溶血毒素；单克隆抗体；磁性免疫层析试纸条

副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus，VP）是一种嗜盐、革兰氏阴性杆状菌，广泛分布于海洋环境和各种海产品中，食用污染该菌而又未经良好加工处理的海产品会引发突发性食物中毒，可导致伤口感染、肠痉挛、败血症、腹泻、头痛和恶心等反应［1-6］。副溶血性弧菌最重要的毒力因子是其产生的多种溶血毒素，主要有耐热的直接溶血毒素（Thermostabledirect hemolysin，TDH），耐热的直接相关溶血毒素（TDH-related hemolysin，TRH）和不耐热溶血毒素（Thermolabile hemolysin，TLH）［7-8］。已有很多报道以 TDH和TRH为目标对象开展了研究［9-11］，然而，并不是所有的VP中都含有这两种溶血毒素。研究发现TLH广泛存在于VP中，且tlh基因具有种属特异性，因此，该基因可作为鉴定识别VP菌株的目标基因［12-13］。……