APP下载

沉默GLUT-1表达对食管鳞癌细胞株TE-TE-1313增殖和迁移的影响△

2016-09-13陈涛刘小兴陈虞梅施一平万良荣刘建军上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科放疗科上海007

癌症进展 2016年1期
关键词:检测

陈涛 刘小兴 陈虞梅 施一平 万良荣 刘建军上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科,放疗科,上海007

沉默GLUT-1表达对食管鳞癌细胞株TE-TE-1313增殖和迁移的影响△

陈涛1*#刘小兴2*陈虞梅1施一平1万良荣1刘建军1
上海交通大学医学院附属仁济医院1核医学科,2放疗科,上海200127

目的研究沉默葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter protein-1,GLUT-1)的表达对食管鳞癌TE-13细胞增殖、周期及迁移的影响及可能的作用机制。方法采用慢病毒转染的方法将特异性针对GLUT-1基因的GLUT-1-shRNA转入TE-13细胞,建立稳定干扰GLUT-1表达的TE-13细胞株,分成GLUT-1-shRNA组和阴性对照组进行对比研究。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测GLUT-1-shRNA对TE-13细胞GLUT-1 mRNA及其蛋白表达的影响。CCK-8法、FCM法和Transwell小室迁移实验分别检测沉默GLUT-1表达后对TE-13细胞增殖、细胞周期和迁移的影响;同时采用蛋白质印迹法检测细胞迁移以及乏氧相关蛋白的表达情况。结果采用慢病毒将GLUT-1-shRNA转入TE-13细胞后,可明显下调GLUT-1蛋白(t=6.713,P<0.01)和mRNA的表达水平(t= 4.181,P<0.05)。与阴性对照组相比,GLUT-1干扰后细胞的增殖至72 h(t=3.097,P<0.05)和96 h(t=3.497,P<0.05)明显被抑制,同时细胞的迁移能力可见下降,但是细胞周期至24 h未见影响;基质金属蛋白酶的MMP-9(t= 6.895,P<0.01)和缺氧诱导因子HIF-1α(t=13.74,P<0.001)的表达明显下调,但是MMP-2的表达没有变化(t= 2.582,P>0.05)。结论沉默GLUT-1的表达可抑制食管磷癌细胞株TE-13细胞的增殖和迁移,并明显下调细胞内MMP-9和HIF-1α蛋白的表达,为寻找靶向治疗食管癌新靶点提供了初步的实验基础。

食管鳞癌;GLUT-1;增殖;细胞周期;迁移

Oncol prog,2016,14(1)

食管癌是常见的消化系统的恶性肿瘤,其发病率在世界上排名恶性肿瘤的第七位[1]。中国是世0界上食管癌的高发地区,发病率位列恶性肿瘤的第四位[2]。食管癌恶性程度高、预后差,尽管随着手术方式以及放、化疗等治疗模式的不断改进,其远期生存率有所提高,但是经过几次大样本的调查之后发现,总的术后5年生存率仍旧为25%~40%[3-4]。……

登录APP查看全文

猜你喜欢

检测
QC 检测
小波变换在PCB缺陷检测中的应用