王长顺

(合肥工业大学，安徽合肥 230009)



霍山石斛多糖单克隆抗体的制备及多糖组织分布研究

王长顺

(合肥工业大学，安徽合肥 230009)

[目的]探讨霍山石斛多糖口腔注射后多糖在小鼠体内的分布状况。[方法]以霍山石斛原球茎中提取的一种多糖与牛血清白蛋白偶联后作为抗原，免疫小鼠获得单克隆抗体，以获得的单克隆抗体为一级抗体对小鼠进行免疫组织化学试验。[结果]证实了CDAP活化法可有效偶联多糖与蛋白质，且以制备的偶联物能引起小鼠免疫反应从而制备出所需的单克隆抗体，利用获得的活性较高、特异性较好的单克隆抗体得到多糖在小鼠组织的分布图。[结论]该方法可为霍山石斛多糖进入机体后分布情况提供科学依据。

霍山石斛；多糖；单克隆抗体；免疫组织化学

霍山石斛(Dendrobiumhuoshanense)俗称米斛，是兰科石斛属的草本植物，主产于大别山区的安徽省霍山县，具有滋养阴津、护肝利胆、补益脾胃、降低血糖、抑制肿瘤及增强免疫力等特点[1]。目前，口服霍山石斛多糖进入机体内，引起活性的物质为多糖大分子还是多糖被分解后小分子引起的活性还不明确。单克隆抗体自问世以来，被广泛应用于生物学领域，多糖类单克隆抗体的制备技术亦十分成熟，王厚延等[2]、姚文兵[3]先后成功地制备出了六味地黄多糖及灵芝多糖的单克隆抗体，为植物多糖药理研究打下了良好的基础。免疫组织化学是单克隆抗体代表性应用之一，利用带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学反应的呈色现象，可以对相应的抗原进行定性、定位、定量的研究。……