张沛，温海深，迟美丽，钱焜

（中国海洋大学水产学院，山东青岛266003）

花鲈瘦素基因的克隆及低盐度条件下调控表达分析

张沛，温海深，迟美丽，钱焜

（中国海洋大学水产学院，山东青岛266003）

瘦素 （Leptin，Lep）在动物摄食、生长、生殖、免疫、能量平衡等方面具有重要作用，为研究花鲈Lateolabrax maculatus Lep功能，采用cDNA末端快速扩增法 （RACE）克隆花鲈LepA cDNA全长序列。急性低盐度调控试验设置海水组 （盐度32）、半海水组 （盐度16）和淡水组 （盐度0），盐度调控24、48、96、144、192 h后测定花鲈肝脏中LepA mRNA的表达情况。结果表明：LepA cDNA全长序列为643 bp，其中开放阅读框483 bp，编码161个氨基酸，其氨基酸序列由信号肽和A、B、C、D 4个α螺旋区域组成；花鲈LepA氨基酸序列与其他物种同源性较低，但三级结构较为保守；花鲈LepA主要在肝脏中表达，其次为脑；低盐调控48 h时，半海水组与淡水组LepA表达无显著性差异 （P＞0.05），但均显著低于海水组（P＜0.05），分别为海水组的33.38%和26.86%。研究表明，急性低盐度调控可降低花鲈LepA表达水平。

花鲈；瘦素；盐度；基因克隆；基因表达

瘦素 （Leptin，Lep）是肥胖基因 （OB）编码的一种蛋白类激素，它在摄食、生长、生殖、免疫、能量平衡等方面具有重要作用［1］。Lep属于Ⅰ-型螺旋细胞因子家族，其三维结构特征包括4 个α螺旋［2］。从小鼠中首次发现并克隆出Lep基因［1］，哺乳动物仅有一种Lep，多数鱼类也只有一种Lep，从部分鱼类如斑马鱼 Danio rerio、青鳉Oryzias latipes、鲤Cyprinus carpio、斜带石斑鱼Epinephelus coioides等中获得了LepA和LepB两种Lep亚型。哺乳动物中Lep主要由脂肪细胞合成［1］，而鱼类Lep主要由肝脏分泌［3］。研究表明，物种间Lep氨基酸序列高度不保守，但其三级结构和功能保守性较高［4］。哺乳动物和鱼类中均发现Lep可通过与下丘脑中特异受体结合，进而控制食欲［5］，调控能量消耗［6］，参与机体的免疫调控［7］，促进细胞因子生成，对动物生长繁殖和胚胎发育具有重要作用［8］。……