马 新，姜 伟，，朱长军

（1.中国医学科学院 北京协和医学院肿瘤医院，北京 100021；2.天津师范大学 生命科学学院，天津 300387）

驱动蛋白分子Kif14细胞内中小体定位的研究

马 新1，姜 伟1，2，朱长军2

（1.中国医学科学院 北京协和医学院肿瘤医院，北京 100021；2.天津师范大学 生命科学学院，天津 300387）

为了探讨决定人体驱动蛋白分子Kif14在细胞有丝分裂末期时定位于细胞中小体的功能域，构建了驱动蛋白分子Kif14各功能域的绿色荧光蛋白（GFP）真核细胞表达质粒，分别转染于人体子宫颈癌细胞HeLa中.应用聚丙烯酰氨凝胶电泳和免疫印迹法（WesternBlot）检测各蛋白的表达情况；应用免疫荧光染色法（immunofluorescence）分别对微管蛋白（Tubulin）、着丝粒相关蛋白（CREST）和DNA染色，荧光显微镜下观察各绿色荧光融合蛋白在有丝分裂末期的亚细胞定位.结果发现，细胞有丝分裂末期，驱动蛋白分子Kif14的N末端GFP融合蛋白定位于中小体（midbody），马达区GFP融合蛋白沿微管分布，杆状尾区GFP融合蛋白以点状分布于细胞质，尾区GFP融合蛋白分布于整个细胞中.由此认为，Kif14驱动蛋白分子的N末端延伸区决定该蛋白分子在细胞有丝分裂末期定位于中小体.

驱动蛋白；Kif14；有丝分裂末期；中小体

驱动蛋白超家族是一类具有ATP水解酶活性、以微管为轨道定向运动的马达蛋白［1-2］，它们参与调控细胞的基本生命活动过程.驱动蛋白分子Kif14（kinesin family member 14）属于Kinesin-3亚家族［3］，它对于机体顺利完成细胞有丝分裂、维持基因组稳定性以及细胞内物质运输具有重要作用［4］.在细胞有丝分裂末期，Kif14对于顺利形成中小……