王　曦,李英慧,陈芳杰

(1.武警辽宁省总队医院军人病区,沈阳110034;2.中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室,沈阳110122)

乙酰化对二甲基精氨酸二甲胺水解酶1表达水平的影响

王曦1,李英慧2,陈芳杰2

(1.武警辽宁省总队医院军人病区,沈阳110034;2.中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室,沈阳110122)

目的以去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(NaBu)和乙酰转移酶p300作为乙酰化作用因素,探讨人胚肾HEK293细胞中乙酰化对二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)表达水平的调节.方法应用rea1-time PCR方法检测NaBu刺激或转染野生型及突变型p300表达载体后DDAH1mRNA表达水平的变化;应用Western b1ot方法检测NaBu和p300对DDAH1蛋白表达水平的影响.结果Rea1-time PCR结果显示NaBu以时间依赖方式上调DDAH1mRNA表达水平,同时转染野生型p300表达载体显著上调DDAH1mRNA水平,而突变型p300作用不明显;Western b1ot结果显示NaBu及野生型p300可提高DDAH1蛋白表达,但突变型p300无此作用,与对DDAH1mRNA表达的作用一致.结论乙酰化可上调HEK293细胞中DDAH1mRNA和蛋白表达水平.

二甲基精氨酸二甲胺水解酶1;丁酸钠;p300;乙酰化

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一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种与血压水平密切相关的有生物活性的小分子物质,它在体内由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化合成.NOS包括神经型(neurona1 NOS,nNOS)、诱导型(inducib1e NOS,iNOS)和内皮型(endothe1ia1 NOS, eNOS)3种.非对称性二甲基精氨酸(asymmetrica1 dimethy1arginine,ADMA)是体内3种NOS的抑制剂,它能够抑制NOS活性,降低NO生物效应.ADMA由二甲基精氨酸二甲胺水解酶(dimethy1arginine dimethy1aminohydro1ase,DDAH)降解[1～3],后者包括DDAH 1和DDAH 2两种亚型.DDAH 1是肾脏近曲小管和肝脏中的主要亚型,其表达水平上调可提高NO生物效应,降低血压.乙酰化是调节基因表达水平的一种重……