裴　涌,郝旭红,孙晓楠

(沈阳市第四人民医院眼科,沈阳110031)

姜黄素在缺氧致视网膜神经节细胞氧化应激损伤中的作用及机制

裴涌,郝旭红,孙晓楠

(沈阳市第四人民医院眼科,沈阳110031)

目的观察姜黄素对缺氧致小鼠视网膜神经节细胞RGC-5氧化应激损伤的影响,并探讨其作用机制.方法以小鼠RGC-5细胞株为研究对象,按照不同处理因素将细胞随机分为4组:正常对照组、缺氧组、缺氧+溶剂(二甲基亚砜)对照组、缺氧+姜黄素预处理组.2′7′-二氯荧光素探针法检测细胞内活性氧自由基(ROS),四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖活性,Western b1ot检测细胞内核转录因子Nrf2蛋白的表达,实时荧光定量RT-PCR检测醌氧化还原酶(NQO1)和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达.结果与正常对照组相比,缺氧组细胞内ROS含量明显增高(P<0.05),细胞活性明显降低(P<0.05);而缺氧+姜黄素预处理组缺氧导致的细胞氧化应激损伤明显减轻,并且细胞内的Nrf2蛋白水平明显增加(P<0.05),NQO1和HO-1mRNA表达明显提高(P<0.05).结论姜黄素能够激活视网膜神经节细胞内Nrf2抗氧化通路,上调其介导的Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶基因NQO1和HO-1的转录活性,从而减轻缺氧导致的视网膜神经节细胞氧化应激损伤.

姜黄素;缺氧;视网膜神经节细胞;核转录因子Nrf2;氧化应激

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视网膜神经节细胞(retina1 gang1ion ce11,RGC)是视网膜最终端的神经元,在视觉信息的整合和传递中至关重要.缺血、缺氧诱发氧化应激导致RGC损伤、变性和凋亡,最终引起视觉功能丧失.姜黄素是从姜黄属中药姜黄、郁金、莪术等的块茎中提取出来的一种酚性色素,医学研究表明其具有抗炎、抗氧化、清除自由基、抗肿瘤等作用,但具体机制还不十分清楚.本研究建立了RGC-5缺氧模型,观察姜黄素对缺氧导致的RGC-5氧化应激损伤的影响,并探讨其作用机制,为预防和治疗RGC缺血、缺氧损伤提供实验依据.

1　材料与方法

1.1材料

小鼠RGC-5细胞株,购自美国ATCC细胞库.姜黄素、二……