龚莉君,　彭　鹏,　袁哲明,2,　柳　傲,　杨中侠,2*

(1. 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室, 湖南农业大学植物保护学院, 长沙　410128; 2. 湖南省生物农药与制剂加工工程技术研究中心, 长沙　410128)



小菜蛾钙黏蛋白片段对Cry1Ac蛋白的增效作用

龚莉君1,彭鹏1,袁哲明1,2,柳傲1,杨中侠1,2*

(1. 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室, 湖南农业大学植物保护学院, 长沙410128; 2. 湖南省生物农药与制剂加工工程技术研究中心, 长沙410128)

根据已报道的昆虫毒素结合区钙黏蛋白片段对Cry1Ac蛋白有增效作用,本文以3龄小菜蛾幼虫为研究对象,选取其钙黏蛋白相同功能区的两个片段,将两个片段进行克隆。通过pGEX-6p-1载体,在大肠杆菌中表达了功能区片段PxCAD1及PxCAD2。使用致死中浓度剂量的CrylAc蛋白(1 μg/mL)及较高浓度的PxCAD1(556 μg/mL)与PxCAD2(551.25 μg/mL)对小菜蛾幼虫进行体外复配生测,结果表明,PxCAD1可使小菜蛾幼虫的致死率上升为85.56%,PxCAD2则不能增强CrylAc蛋白的杀虫活性;而PxCAD1与PxCAD2本身对于小菜蛾幼虫并无毒性。研究结果为筛选有效的协同片段提供了理论依据,对于揭示Bt杀虫蛋白的毒理机制和害虫对Bt杀虫蛋白的抗性机制具有重要意义。

小菜蛾;钙黏蛋白片段;Cry1Ac;增效作用;表达

苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)是目前世界上产量最大、应用最广泛、杀虫范围最广的微生物杀虫剂[12]。Bt晶体毒素被敏感昆虫取食后,其在幼虫肠道碱性环境和蛋白酶的作用下被激活,释放出活性毒素蛋白。活性毒素蛋白随后与幼虫中肠上皮细胞的特异性受体结合形成毒素寡聚体,诱导毒素分子的空间构象发生变化。……