2,4-二氯苯氧乙酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备
2016-08-30王秋艳张宁秦朝秋牛承辉
王秋艳 张宁 秦朝秋 牛承辉
(辽宁出入境检验检疫局 辽宁大连 116001)
2,4-二氯苯氧乙酸人工抗原合成及多克隆抗体的制备
王秋艳张宁秦朝秋牛承辉
(辽宁出入境检验检疫局辽宁大连116001)
采用碳化二亚胺法,将2,4-二氯苯氧乙酸 (2,4-D)分别与牛血清白蛋白 (BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,得到完全免疫原2,4-D-BSA和包被原2,4-D-OVA,采用紫外扫描法判定偶联结果;用2,4-D-BSA免疫新西兰大耳白兔,采用间接酶联免疫吸附测定法测定多抗血清效价、阻断酶联免疫吸附测定法测定其抑制曲线。结果表明:BSA与2,4-D偶联后,波峰出现右移,且具有2,4-D特征峰,表明偶联成功;2只新西兰大耳白兔血清效价均达到了1∶5.12×105,且B号兔子多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50为47.64 ng/mL,表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力较高的兔源抗2,4-D多克隆抗体血清,为2,4-D残留免疫学检测方法的建立奠定了良好基础。
2,4-二氯苯氧乙酸;人工抗原;兔源多抗血清
1 前言
2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)是人工合成、类似于生长素的一种植物生长调节剂,分子式为C8H6C12O3,白色粉末,属于苯氧羧酸类物质,强酸性,较易溶于碱溶液、醇类和乙醚,不溶于石油和钠盐。2,4-D是常用的除草剂和植物生长调节剂[1],能够促进细胞伸长和分裂、新器官的分化和形成,此外还可以防止果实脱落[2]。但是,2,4-D可以通过皮肤和呼吸系统进入体内,刺激人体分泌大量的雌性激素,干扰内分泌系统,对生殖和免疫系统产生不良影响,具有潜在的致癌性和致突变性,许多国家都制定了该化合物在农产品中的残留限量。……
