王维 段碧霞 曾丽

电离辐射所致的肿瘤细胞DNA损伤主要为链断裂：单链断裂（single strand breaks,SSBs）与双链断裂（double strand breaks,DSBs）；其中SSBs发生的频率是DSBs的10倍-20倍[1]。在通常情况下，电离单击所致的SSBs多能通过细胞内聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-rbose)polymerase,PARP]、DNA连接酶以及其他损伤修复相关因子的参与进行较完整的修复[2]，而DSBs的修复则要困难很多，需通过激活同源重组（homologous recombination,HR）或非同源末端连接（nonhomologous end joining,NHEJ）途径完成[1,3]。DSBs成为电离辐射在细胞染色体上最致命的损伤，DNA损伤修复与否则是影响受照细胞存活的关键因素[1,4]。基于PARP在细胞SSBs修复中的关键性作用，靶向抑制其修复的新思路成为近年来研究的热点之一，相关新药Olaparib（PARP1/PARP2/PARP3抑制剂，奥拉帕尼）于2014年12月美国FDA批准上市。临床研究[5-7]结果表明，Olaparib联合紫杉醇、吉西他滨、铂类等化疗药物治疗可使得患者获益。目前，PARP抑制剂在联合放疗方面研究较少，已有的相关研究报告[8,9]显示，其在体外联合照射细胞可提高放疗生物效应。本实验在Lewis肺癌细胞及小鼠移植瘤模型上研究PARP抑制剂联合放疗时生物效应的变化，并探索其可能的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株与实验小鼠 Lewis肺癌细胞株为本实验室保存。C57/BL小鼠：雌性，6周-8周龄，重15 g-20 g，饲养于无特定病原体（specific pathogen free,SPF）级环境，购于北京华阜康生物科技公司，实验动物许可证编号：SCXK(京)2014-0004。实验获本院动物保护和应用委员会批准，动物实验人员资格证书编号：CQLA-2013-0734。

1.1.2 主要试剂 MTT试剂盒购于北京康为世纪生物科技公司，Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒购于Biosciences公司，Olaparib-AZD2281购于Selleck Chemicals公司，BCA蛋白浓度测定、Beyo ECL Plus发光……