秦海斌，朱海娟，朱　骞，宋珍华，温　海，贺星亮，高一龙

(公安部南京警犬研究所警犬技术公安部重点实验室，江苏南京 210012)



研究论文

犬IFN-γ的原核表达及其对A型流感病毒H3N2亚型的抑制作用

秦海斌，朱海娟，朱骞*，宋珍华，温海，贺星亮，高一龙

(公安部南京警犬研究所警犬技术公安部重点实验室，江苏南京 210012)

摘要：为研究犬的γ干扰素(IFN-γ)对犬流感病毒H3N2亚型的抑制作用，由经ConA诱导过的健康犬淋巴细胞中特异性地扩增犬IFN-γ(cIFN-γ)基因，构建重组原核表达载体pET-cIFN-γ，转化宿主菌BL21(DE3)中进行诱导表达，以MDCK-VSV法对纯化后产物进行抗病毒活性鉴定，并在MDCK细胞上测定对H3N2亚型犬流感病毒的抑制作用。结果表明，表达产物以包涵体形式存在，经变性、复性、纯化后，所制备犬IFN-γ的抗病毒活性为1.1×105 U/mg，重组犬IFN-γ稀释26倍后对犬流感病毒的增殖仍具有明显抑制作用。本研究成功表达了具备抗H3N2亚型流感病毒活性的犬IFN-γ，为犬流感病毒新型药物的开发奠定了基础。

关键词：犬；γ干扰素；原核表达；流感病毒

犬流感(Canine influenza，CI)是由正黏病毒科A型流感病毒属犬流感病毒(CIV)引起的一种犬属动物接触性呼吸道传染病，患犬临床症状表现为体温升高、流鼻液、咳嗽、食欲减退、呼吸困难等[1]。研究证实，多种来源的流感病毒均可以自然感染犬类，包括禽源H3N2亚型、H5N1亚型、H5N2亚型、H9N2亚型、禽源 H3N2重组的H3N1亚型毒株、马源H3N8亚型病毒及H3N2亚型人流感病毒等[2]。虽然只有禽源 H3N2亚型和马源 H3N8 亚型流感病毒能够在犬中水平传播并形成较稳定遗传谱系，但是由于A型流感病毒具备较强的重组变异和跨物种传播能力[3]，犬流感病毒潜在的公共卫生问题备受关注。……