三疣梭子蟹细胞周期蛋白H基因克隆及其在卵巢发育中的表达分析❋
2016-08-13贾复龙孟宪亮高保全高天翔
贾复龙, 孟宪亮, 刘 萍❋❋, 李 健, 高保全, 高天翔, 宋 娜
(1. 中国海洋大学水产学院,山东 青岛 266003;2. 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东 青岛 266071;3. 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东 青岛 266071)
三疣梭子蟹细胞周期蛋白H基因克隆及其在卵巢发育中的表达分析❋
贾复龙1,2,3, 孟宪亮2,3, 刘萍2,3❋❋, 李健2,3, 高保全2,3, 高天翔1, 宋娜1
(1. 中国海洋大学水产学院,山东 青岛 266003;2. 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东 青岛 266071;3. 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东 青岛 266071)
摘要:Cyclin H作为细胞周期调控活动中的关键因子,通过与相应的细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdks)结合来调控细胞周期中的各个环节,而三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢发育过程中存在旺盛细胞分裂活动的阶段,关于其卵巢发育的分子机制研究依旧较少。本实验通过SMART RACE方法,获得三疣梭子蟹cyclin H基因cDNA序列全长。并通过实时荧光定量PCR对其进行三疣梭子蟹卵巢发育相关的表达分析。结果发现,基因全长1 077 bp,开放阅读框(ORF)、5’及3’非编码区(UTR)长度分别为999、31和46 bp。预测编码一个包含332个氨基酸,分子量、等电点分别为38.89和 6.20kDa的蛋白质,蛋白序列包含一个周期蛋白盒保守结构域。同源分析表明,三疣梭子蟹Cyclin H蛋白序列其他甲壳动物有着较高的同源性,与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)和斑节对虾(Penaeus monodon)的同源性分别为95%和80%。表达分析……