转cry1Ab13基因玉米新种质的创制
2016-08-05陈沼汀董昭旭孙国旭魏晓禹关淑艳
陈沼汀, 董昭旭, 刘 双, 孙国旭, 李 晖, 魏晓禹, 孙 苏, 关淑艳
(吉林农业大学 生命科学学院, 吉林 长春 130118)
转cry1Ab13基因玉米新种质的创制
陈沼汀, 董昭旭, 刘双, 孙国旭, 李晖, 魏晓禹, 孙苏, 关淑艳
(吉林农业大学 生命科学学院, 吉林 长春 130118)
摘要:【目的】构建包含抗鳞翅目害虫基因cry1Ab13的重组植物表达载体,并利用其创制对玉米螟Ostrinia furnacalis具有优良抗性的转基因玉米Zea may L.新种质。【方法】利用同源重组法将cry1Ab13基因连接到表达载体pCAMBIA3300-Bar上,获得以抗除草剂Bar基因为筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3300-cry1Ab13-Bar。通过农杆菌介导法转化玉米自交系H99幼胚,对再生植株进行逐代除草剂筛选、PCR检测及T2代植株的Southern blotting检测、实时荧光定量 PCR检测,并对转基因植株进行田间及室内抗虫性鉴定。【结果】构建了cry1Ab13基因的植物表达载体,转化玉米获得3株高抗玉米螟和1株抗玉米螟的T2代转基因植株。Southern blotting证明cry1Ab13基因已经整合到玉米基因组中,实时荧光定量PCR结果表明cry1Ab13基因已经在玉米植株内表达。抗虫性鉴定结果表明,与对照相比转基因植株对玉米螟的抗性显著提高。【结论】将cry1Ab13基因导入玉米并成功表达,显著提高了转基因玉米对玉米螟的抗性,为抗虫玉米新种质的创制奠定了基础。
关键词:抗虫性; cry1Ab13基因; 转基因玉米; 玉米螟
玉米ZeamayL.是我国重要的粮食作物,在粮食、饲料、工业、能源等方面都有着重要的应用[1]。据统计,到2020年我国将实现粮食增产500亿kg,其中玉米增产占53%[2]。提高玉米产量对于我国粮食安全及经济发展具有重要战略意义。
亚洲玉米螟Ostriniafurnacalis是鳞翅目螟蛾科昆虫,是影响我国玉米生产的主要害虫。……
