刘亚利,赵国桢,张平,嵇波,戴健,路雅雯,严明娜,王丹,郭孟玮,毛颖秋,孙晓敏,白红新,许咏思(.北京中医药大学针灸推拿学院,北京 0009;.首都医科大学,北京 00069)



·动物实验·

电针对急性心肌缺血损伤大鼠相关经穴皮肤血流灌注量影响的后效应研究

刘亚利1,赵国桢2,张平1,嵇波1,戴健1,路雅雯1,严明娜1,王丹1,郭孟玮1,毛颖秋1,孙晓敏1,白红新1,许咏思1
(1.北京中医药大学针灸推拿学院,北京 100029;2.首都医科大学,北京 100069)

【摘要】目的通过观察大鼠处于正常生理态、心肌缺血损伤病理态、低频或高频电针干预态时相关经穴皮肤血流灌注量随时间变化的情况,探寻不同频率电针治疗心肌缺血损伤后其相关经穴反映的后效应。方法将50只雄性Wistar大鼠按照随机数字表分为空白对照组、假手术组、模型组、经穴低频电针治疗组(经穴A组)、经穴高频电针治疗组(经穴B组)5组,每组10只。于第3次治疗结束后即刻、30 min、60 min应用激光散斑衬比成像技术观测各组大鼠双侧内关、郄门、天泉穴区和非经非穴对照点的皮肤血流灌注量,并进行统计分析。结果与空白对照组比较,模型组内关、郄门、天泉双侧穴区皮肤血流灌注量均显著降低(P＜0.01,P＜0.05);低频或高频电针治疗后,各穴区皮肤血流灌注量不同程度升高,其中经穴A组内关、郄门、天泉双侧穴区均以治疗后即刻血流灌注量更接近空白对照组;经穴B组左侧3个穴位均以治疗后30 min更接近空白对照组,而右侧3个穴位均以治疗后60 min更接近空白对照组。结论低频电针在干预心肌缺血损伤时对穴区血流灌注量变化影响的即时效应优于高频电针;高频电针在干预心肌缺血损伤时对穴区血流灌注量变化影响的后效应优于低频电针。

【关键词】心肌缺血损伤;电针;皮肤血流灌注量;针灸后效应;大鼠

皮肤血流由微动脉和微静脉流经体表形成,皮肤血流灌注量(skin blood perfusion)的改变不仅反映局部状态,而且还反映全身生理病理变化[1]。近年有研究应用激光散斑衬比成像技术,发现人体正常状态下经穴和非穴对照点之间的血流存在显著性差异[2]。我们前期研究发现,内脏处于不同状态时在体表相关经脉经穴上皮肤血流灌注量会出现特征性变化。以往有研究发现,针刺对疾病的治疗具有时间效应,其中针灸后效应是指停止针刺治疗后仍然持续存在的针刺效应[3],且这种效应会随时间延长而发生规律性变化[4-6]。有研究提出针刺相关经穴对正常人脑功能网络反应会呈现出典型的时间序列,表现为一种迟发的、逐渐达到峰值并逐步回落的效应,并且对脑功能区的激活效应甚至可以维持到针刺后的30 min[7-8],进一步证明针刺对机体的调节具有后效应。但是,针灸在调节内脏生理病理变化后其相关经穴上反映的后效应情况的研究却较少。因此,本实验采用激光散斑衬比成像(laser speckle contrast imaging,LSCI)技术,进一步观察大鼠处于正常生理态、心肌缺血损伤病理态、低频或高频电针干预态时相关经穴内关、郄门、天泉穴区皮肤血流灌注量随时间的变化规律,旨在探寻针刺调治机体功能状态时,其相关经穴反映的后效应,为临床应用穴位诊察机体功能状态变化规律和针灸调治疾病规律提供依据。

1　材料与方法

1.1实验动物

清洁级健康Wistar大鼠,雄性50只,7周龄,体重200～230 g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供,合格证号为SCXK(京)2012-0001,实验前将动物饲养于室温(24±1)℃,相对湿度(45±5)%的环境中,日光灯照射,12 h明暗交替,以清洁级大鼠饲料和自由饮水适应性喂养72 h。本项研究的动物实验过程均遵守美国国立卫生院倡导的实验动物关怀和使用指导原则(Guide for Care and Use of Laboratory Anamals,NIH)和以减少(Reduction)、替代(Replacement)和优化(Refinement)为核心的动物实验“3R”原则。

1.2主要试剂和仪器

20%乌拉坦(天津药业焦作有限公司生产,批号T20091109);注射用青霉素钠(哈药集团制药总厂生产,批号CD1408008-1);二导HAN’s穴位刺激仪(LH202H,北京华卫产业开发有限公司);华佗牌无菌针灸针(0.20 mm×13 mm,苏州医疗用品厂有限公司);BL-420E﹢生物机能实验系统(TM003-002,成都泰盟科技有限责任公司);动物呼吸机(HX-300S,成都泰盟软件有限公司);医用冷光源(LG100-2,上海安信光学仪器制造有限公司);恒温恒湿实验系统(SG-H1,南京盛光光电医疗仪器有限责任公司);激光散斑血流成像仪(PeriCam,PSI-NR瑞典帕瑞公司)。

1.3急性心肌缺血模型制备

根据以往研究者采用的大鼠冠状动脉左前降支结扎制备的心肌缺血损伤模型并加以改良[9]。20%乌拉坦4.5 mL/kg腹腔注射麻醉,经口腔气管插管后,连接动物呼吸机(呼吸频率80～90次/min,吸呼比1:1,潮气量7 mL/kg),连接BL-420E﹢生物机能实验系统,大鼠左上肢、左下肢、右下肢,依次接黄色、黑色、红色电极,持续监控心电(大鼠心电图的肢体Ⅱ导联)。正中偏左侧胸部备皮,常规碘伏消毒,在第4、5肋间沿胸骨左缘纵向剪开胸部皮肤约1.5 cm,剪开肌肉层,断开第4、5胸肋连接处,放入开睑器,暂时关闭呼吸机(以防伤及肺脏),迅速撑开开睑器后(约1.5 cm×1.5 cm见方),再次打开呼吸机。在冷光源下,用眼科弯镊撕破心包膜,在动脉圆锥和左心耳交界下约2 mm处,将左冠状静脉和左冠状动脉一起结扎,进针深度约1～1.5 mm,快速排出胸腔气体和液体后,逐层缝合,伤口消毒,同时颈部皮下每天每次注射青霉素40万U,以防感染。见图1。模型评价,以结扎线上下心肌颜色发绀、发白,并出现心电图J点抬高,初步证明造模成功。剔除结扎前心电图不正常或中途死亡及造模不成功的大鼠。术后注意保暖,排痰以保持呼吸通畅。

图1　模型制备及皮肤血流测量

1.4实验分组

按照随机数字表将50只大鼠分为空白对照组、假手术组、心肌缺血损伤组(简称模型组)、经穴低频电针治疗组(简称经穴A组)、经穴高频电针治疗组(简称经穴B组),每组10只。每组6只用于皮肤血流研究。

1.5各组处理方法

空白对照组:常规饲养,除不手术、不电针外,抓取和固定时间同电针组,每天1次,共3 d。

假手术组:只在大鼠冠状动脉左前降支结扎点穿线,不结扎,其余操作过程同模型组,并且抓取和固定条件同电针组。

模型组:结扎大鼠冠状动脉左前降支,形成心肌缺血损伤改变,抓取和固定条件同电针组。

经穴A组:造模成功后,用华佗牌0.20 mm×13 mm毫针直刺左侧内关,深度约2 mm,在左侧内关穴外上方0.5 cm非穴处,皮下平刺1 mm,连接HANS/LH202型电针仪,负极接内关穴针柄,正极接非穴针柄。电针频率2 Hz,电流强度以大鼠前肢微微颤动为度(1 mA)。造模后,电针治疗每天1次,每次20 min,共治疗3 d。

经穴B组:除电针频率采用100 Hz外,其余各项均同经穴A组。

1.6取穴

根据大鼠形态、解剖、生理特点,参照张露芬主编《实验针灸学》穴位标准定位。内关(心脏相关经脉络穴)穴位于前肢内侧,距腕关节约3 mm左右的尺桡骨缝间;郄门(心脏相关经脉郄穴)位于前肢内侧,距腕关节约7 mm左右尺桡骨缝间;天泉(心脏相关经脉穴位)腋前横纹头下约5 mm;非经脉对照点为环跳穴外5 mm(后肢髋关节后上缘外0.5 cm)左右。

1.7经穴和非经非穴区域血流灌注量检测方法

1.7.1仪器条件设置

工作环境温度15～30℃,相对湿度10%～80%,大气压700～1600 mbar。设置采样频率5图像/s,平均化记录5,有效采样频率1图像/s;监测距离20～25 cm,每张图像监测范围,腹面3 cm×14 cm,背面5 cm× 5 cm。

1.7.2检测方法

大鼠在麻醉前24 h将待测部位脱毛,并用清水洗净脱毛剂。测试前将大鼠麻醉,固定于台架上,置于电热板上保温待测,调节室内环境,保持温度(23±1)℃,相对湿度(55±5)%,并且无日光直射及明显空气对流。测试时将激光散斑血流成像仪的扫描头对准测定部位,检测经穴和非经非穴区域皮肤血流变化。尽量保持大鼠相对安静,若大鼠因麻醉状态不稳而抽动,则在数据处理时避开该“运动伪迹”部分,选择感兴趣时间段(TOI)。

1.7.3检测部位

大鼠心包经内关、郄门、天泉穴区域和非经非穴对照点(环跳穴外5 mm)。

1.7.4检测时机

4.对于中等级的金融风险，企业需要开展实时的动态监控工作，而且需要有针对性地进行防治，避免风险出现升级的情况。

于第3次电针治疗后即刻、30 min、60 min观测空白对照组、假手术组、模型组、经穴A组和经穴B组的各检测区域血流灌注量变化。

1.7.5数据处理

记录各组检测区域血流图,用PIMSoft血流仪成像处理软件进行分析。打开各组各检测区域血流图像,定义上肢内关、郄门、天泉和非穴点为感兴趣区域(ROI),选择测量穴区面积1～1.5 mm2内平均血流灌注量(PU),为排除大鼠个体差异,以经穴血流灌注量减去非穴点血流灌注量的差值作为各经穴最终的血流灌注量[10]来进行统计分析。见图2。

图2　相关经穴皮肤血流成像图

1.8统计学方法

应用SPSS20.0统计软件包进行统计学处理,数据以均数±标准差表示。各组组间差异采用单因素方差分析,继以LSD检验每两组之间的差异,非正态分布采用非参数检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1心肌形态学的变化

空白对照组心肌细胞为排列紧密规则,胞质、胞核显示清晰,细胞膜完整,核居中,未见炎性细胞。与空白对照组比较,假手术组可见少量坏死的心肌细胞,心肌纤维波浪状改变,并有散在的白细胞浸润;模型组心肌细胞核碎裂、消失,胞质均呈不规则粗颗粒状,心肌纤维凝固性坏死、间质水肿,有少量中性粒细胞浸润。与模型组比较,经穴A组心肌细胞排列恢复紧密化,核居中,在缺血坏死区内开始出现增生的细胞,炎细胞浸润明显减少;经穴B组在缺血坏死区内,增生的细胞逐渐成长梭形排列,并与周围的心肌组织相延续。结果见图3。

图3　各组心肌细胞(×400)

2.2.1左侧各组内关穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,假手术组与模型组穴区皮肤血流灌注量变化值均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,低频或高频电针治疗结束后即刻穴区皮肤血流灌注量变化值均显著升高(P＜0.01),治疗后30 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量显著升高(P＜0.01),治疗后60 min低频和高频电针穴区皮肤血流灌注量显著升高(P＜0.01)。比较不同时间点内关穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量有升高趋势但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先降低再升高的变化趋势但无统计学意义,其中以治疗后30 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常水平。结果见表1。

2.2.2左侧各组郄门穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,模型组穴区皮肤血流灌注量显著降低(P＜0.05);与模型组比较,低频或高频电针治疗结束后即刻穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.05,P＜0.01),治疗后30 min低频或高频电针组穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01,P＜0.05),治疗后60 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01)。比较不同时间点郄门穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量有升高趋势但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先降低再升高的变化趋势但无统计学意义,其中以治疗后30 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常水平。结果见表1。

2.2.3左侧各组天泉穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,模型组大鼠穴区皮肤血流灌注量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,低频或高频电针治疗结束后即刻穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01);治疗后30 min时低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01);治疗后60 min时,低频和高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01)。比较不同时间点天泉穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量有升高趋势但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先降低再升高的变化趋势但无统计学意义,其中以治疗后30 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常水平。结果见表1。

表1　各组大鼠左侧相关经穴不同时间点皮肤血流灌注量变化

表1　各组大鼠左侧相关经穴不同时间点皮肤血流灌注量变化　

注:与空白对照组比较1)P＜0.05,2)P＜0.01;与模型组比较3)P＜0.05,4)P ＜0.01

组别　n　　内关　　郄门　　天泉空白对照组　6　38.99±6.57　65.48±7.96　47.85±4.08假手术组　6　27.59±7.881)61.03±15.78　27.54±12.22模型组　6　1.71±4.652)21.75±7.641)　7.68±3.602)经穴A组即刻　6　42.55±3.154)74.13±9.123)58.37±8.154)经穴A组30 min　6　47.64±6.824)81.27±9.834)71.03±10.434)经穴A组60 min　6　51.24±4.534)91.84±11.374)90.19±5.194)经穴B组即刻　6　68.36±9.604)92.43±20.704)70.16±5.934)经穴B组30 min　6　48.47±6.354)72.02±16.373)53.54±14.194)经穴B组60 min　6　55.04±9.044)78.06±23.204)56.10±8.934)

2.3心肌不同状态时右侧不同经穴区域皮肤血流灌注量变化值的时间效应

2.3.1右侧各组内关穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,模型组穴区皮肤血流灌注量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,低频或高频电针治疗结束后即刻穴区皮肤血流灌注量显著升高(P＜0.01);治疗后30 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.05,P＜0.01);治疗后60 min低频和高频电针穴区皮肤血流灌注量显著升高(P＜0.01)。比较不同时间点内关穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先降低后升高的趋势,但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常值;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先升高再降低的变化趋势但无统计学意义,其中以治疗后60 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常。结果见表2。

2.3.2右侧各组郄门穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,模型组穴区皮肤血流灌注量显著降低(P＜0.05);与模型组比较,低频或高频电针治疗后即刻穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.05, P＜0.01);治疗后30 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01);治疗后60 min低频和高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.05)。比较不同时间点郄门穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先升高再降低的趋势,但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先升高再降低的变化趋势,与30 min时比较,60 min时穴区皮肤血流灌注量显著降低(P＜0.05),以治疗后60 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常。结果见表2。

表2　各组大鼠右侧相关经穴不同时间点皮肤血流灌注量变化

表2　各组大鼠右侧相关经穴不同时间点皮肤血流灌注量变化　

注:与空白对照组比较1)P＜0.05,2)P＜0.01;与模型组比较3)P＜0.05,4)P ＜0.01;与经穴B组30 min比较5)P＜0.05

组别　n内关　　郄门　　天泉空白对照组　644.20±6.99　63.26±4.40　56.25±8.63假手术组　624.97±9.83　60.13±18.68　30.03±11.361)模型组　6﹣0.20±3.322)　23.46±8.041)　8.49±4.932)经穴A组即刻　6　40.77±5.064)　64.13±5.743)　65.96±6.814)经穴A组30 min 6　23.95±9.333)　88.20±12.794)80.11±8.904)经穴A组60 min 6　39.27±4.504)　58.91±11.403)70.29±4.804)经穴B组即刻　6　59.15±7.974)　90.98±10.924)67.87±10.564)经穴B组30 min 6　59.89±8.254)109.98±14.394)63.64±5.774)经穴B组60 min 6　48.15±10.384)68.99±18.803)5)51.47±5.004)

2.3.3右侧各组天泉穴区皮肤血流灌注量变化值

与空白对照组比较,假手术组与模型组穴区皮肤血流灌注量均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,低频或高频电针治疗结束后即刻穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01),治疗后30 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量均显著升高(P＜0.01),治疗后60 min低频或高频电针穴区皮肤血流灌注量显著升高(P＜0.01)。比较不同时间点天泉穴皮肤血流灌注量,低频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现先升高再降低的趋势但无统计学意义,其中以即刻的皮肤血流灌注量最接近正常;高频电针治疗后随时间延长血流灌注量呈现降低的趋势但无统计学意义,其中以治疗后60 min穴区皮肤血流灌注量最接近正常。结果见表2。

3　讨论

内脏器官生理或病理变化在体表经脉穴位上的反映一直是针灸领域的研究热点,人们采用生物物理或生物化学的方法从某个角度或一定程度上证明了其相关性或规律性。激光散斑衬比成像技术是利用激光照射到被测组织上,依据组织血管中红细胞运动产生的后向动态散斑对比度值,以获取血流灌注量信息[11],具有非接触、无创伤和快速成像等优点,非常适用于皮肤微循环的测量[12],近年来该项技术已经应用于经穴血流灌注量的观测。本研究采用该技术观测了心肌处于不同状态时相关经穴穴区血流灌注量变化的后效应特征。

3.1大鼠处于心肌缺血损伤状态时相关经穴血流灌注量变化

皮肤血流灌注量变化与心肌功能密切相关,血容量下降可能引起皮肤血流灌注量的减少[13-14]。同时,皮肤血流灌注量变化又由交感神经调控,尤以交感缩血管神经支配最丰富[15-17]。Kuroko Y等[18]研究发现急性心肌缺血常伴随着心肌内大量NA释放,交感神经兴奋性增强;并且Charkoudian N等[19]研究发现,皮肤血管舒缩反应由交感神经的分支来支配,交感神经兴奋后释放NA、神经肽Y等递质来减少皮肤血流灌注量。本研究中模型组心肌细胞核碎裂、消失,胞质均呈不规则粗颗粒状,心肌纤维凝固性坏死、间质水肿,证明心肌处于缺血损伤状态。心肌处于缺血损伤态时,交感神经兴奋性增强,血管收缩,穴区皮肤血流灌注量下降;同时心肌缺血损伤模型制备中,大鼠血容量减少,皮肤血流灌注量亦减少。从实验结果中可看出,心脏相关经脉左侧或右侧心包经经脉线上内关、郄门、天泉穴区皮肤血流灌注量均有降低,并以天泉和内关穴区降低最明显。说明心肌缺血损伤大鼠的外周支配血管的交感神经可能还处于兴奋状态,外周微血管收缩,血流灌注量降低。

3.2低频电针干预态时相关经穴血流灌注量变化的后效应

有研究发现低频电针(1～5 Hz)刺激可以显著抑制交感神经兴奋以调节心功能的改变[20]。本研究中低频电针干预后即刻内关、郄门、天泉穴区血流灌注量均显著升高,说明低频电针治疗后即刻可以显著抑制交感神经兴奋,舒张血管,从而升高相关经穴皮肤血流灌注量;同时发现低频电针干预后即刻经穴血流灌注量较干预后30 min或60 min更接近正常水平,表明低频电针起效较快,即刻效应较好。这与康建华[21]研究认为2 Hz电针加快排尿速度的即刻效应优于100 Hz电针的结果相一致。

3.3高频电针干预态时相关经穴血流灌注量变化的后效应

有研究表明100 Hz高频电针刺激对机体的影响不同于2 Hz低频电针,从兴奋的神经纤维类型到引起中枢组织释放的神经肽类物质均有差别[22]。本研究结合不同频率电针效应特点和针刺效应的时效规律拟以针刺后即刻、30 min、60 min作为观察时间点,探寻这种依赖于时间模式的响应区域的皮肤血流灌注量与不同电针频率之间的关系。高频电针干预后,各相关经穴表现出左侧以30 min时皮肤血流灌注量最接近空白对照组,右侧以60 min时皮肤血流灌注量最接近空白对照组。说明高频电针后相关经穴皮肤血流灌注量的变化不同于低频电针效应,高频电针对心肌缺血损伤的调控表现出一种迟发的效应,高频电针调控下心肌缺血损伤大鼠右侧相关经脉穴位血流灌注量的影响潜伏期较左侧长,这可能与针刺左侧穴位有关。

4　结论

不同频率电针内关穴对心肌缺血损伤大鼠相关经穴皮肤血流灌注量的调控存在一定的时间规律变化特征。在心肌缺血损伤状态下,大鼠心包经经脉线上内关、郄门和天泉穴区皮肤血流灌注量普遍降低;低频电针治疗后,各穴区双侧均以即刻皮肤血流灌注量最接近正常值;高频电针治疗后,各穴位左侧以30 min时皮肤血流灌注量最接近正常值,右侧以60 min时皮肤血流灌注量最接近正常值。综上,低频电针或高频电针治疗后,大鼠心包经经脉线上穴区皮肤血流灌注量均升高,低频电针对经穴皮肤血流灌注量的影响起效快,即刻效应优于高频电针;高频电针对经穴皮肤血流灌注量的影响起效慢,针灸后效应优于低频电针。

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【中图分类号】R2-03

【文献标志码】A

DOI:10.13460/j.issn.1005-0957.2016.06.0732

文章编号:1005-0957(2016)06-0732-06

收稿日期2015-12-20

基金项目:国家自然科学基金面上项目(81373558)

作者简介:刘亚利(1989-),女,2013级硕士生,Email:846960157@ qq.com

通信作者:嵇波(1965-),女,教授,博士,博士生导师,研究方向为针灸作用规律与机理研究,Email:jibo678@263.net

Study of the Post Effect of Electroacupuncture on Blood Flow in the Skins of Related Meridian Points in Rats with Acute Ischemic Myocardial Injury

LIU Ya-li1,ZHAO Guo-zhen2,ZHANG Ping1,JI Bo1,DAI Jian1,LU Ya-wen1,YAN Ming-na1,WANG Dan1,GUO Meng-wei1,MAO Ying-qiu1,SUN Xiao-min1,BAI Hong-xin1,XU Yong-si1.
1.Beijing University of Traditional Chinese Medicine School of Acupuncture and Massotherapy,Beijing 100029,China;2.Capital Medical University,Beijing 100069,China

[Abstract]ObjectiveTo observe over-time changes in rat blood flow in the skins of related meridian points during physiological status,the pathological state of ischemic myocardial injury and low or high frequency electroacupuncture intervention and explore the post effect of different frequency electroacupuncture on related meridian points after treating ischemic myocardial injury. MethodFifty male Wister rats were randomized into five groups:blank control,sham operation,model,low frequency electroacupuncture(meridian point A)and high frequency electroacupuncture(meridian point B),10 rats each.Blood flow in the skins of bilateral points Neiguan(PC6),Ximen(PC4)and Tianquan(PC2),and non-meridian and non-acupoint control points was measured by laser speckle contrast imaging in every group immediately and at 30 and 60 min after the end of three treatments. Statistical analysis was made.ResultBlood flow in the skins of bilateral points Neiguan,Ximen and Tianquan was significantly lower in the blank control group than in the model group(P＜0.01,P＜0.05).Blood flow in the skin of every acupoint increased in varing degrees after low or high frequency electroacupuncture treatment.Blood flow in bilateral points Neiguan,Ximen and Tianquan regions in meridian point group A was closer to that in the blank control group immediately after treatment.Blood flow in three left-side and three right-side acupoint regions in meridian point group B was closer to that in the blank control group at 30 and 60 min,respectively,after treatment.ConclusionThe immediate effect of low frequency electroacupuncture on blood flow in acupoint regions is better than high frequency electroacupuncture during intervention in ischemic myocardial injury.The post effect of high frequency electroacupuncture on blood flow in acupoint regions is better than low frequency electroacupuncture during intervention in ischemic myocardial injury.

[Key words]Ischemic myocardial injury;Electroacupuncture;Dermal blood flow;Acupuncture post effect;Rats