殷　音

(石河子大学医学院第一附属医院心内科，新疆　石河子　832008)



沙格列汀降低自发性高血压大鼠血压的效果及作用机制

殷音

(石河子大学医学院第一附属医院心内科，新疆石河子832008)

〔摘要〕目的探讨沙格列汀降低自发性高血压大鼠(SHR)血压的效果及作用机制。方法选择30只SHR，按随机数字表法分为干预组和对照组(n=15)，同时选择15只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为WKY组。干预组大鼠每日给予剂量为10 mg/kg的沙格列汀灌胃处理，同期给予对照组及WKY组等体积的超纯水，均持续8 w。以无创伤血压测定仪测量三组大鼠处理前后的尾动脉收缩压(SBP)，测量间期2 w；显微镜下观察主动脉的病理形态学变化；分别采用放射免疫法、酶联免疫法、硝基还原法检测血浆中的胰高血糖素样肽(GLP)-1、内皮素(ET)-1和一氧化氮(NO)水平。结果(1)干预组SBP随处理时间的延长逐渐降低，而对照组逐渐升高，且干预组处理后的SBP均低于同期对照组，而仍高于同期WKY组(P<0.05)。(2)显微镜下观察显示，对照组和干预组均表现不同程度的平滑肌细胞增生肥大、内膜增厚，但干预组较对照组有所改善。(3)8 w后干预组大鼠的血浆GLP-1水平均显著高于WKY组及对照组(P<0.05)；对照组和干预组的ET-1水平较WKY组明显升高，NO水平明显降低，而干预组ET-1水平低于对照组，NO水平高于对照组(P<0.05)。结论沙格列汀可降低SHR的动脉血压，其机制可能与抑制ET-1的释放、促进NO的合成有关。

〔关键词〕沙格列汀；自发性高血压；内皮素-1；一氧化氮

高血压是公认的心脑血管疾病的独立危险因素。沙格列汀是一种新型的强效降血糖药物，主要通过抑制二肽基肽酶4(DPP-4)对胰高血糖素样肽(GLP)-1的降解，延长肠促胰岛素在体内的半衰期而发挥作用〔1〕。近年来沙格列汀对心血管的保护作用受到广泛瞩目〔2〕，而关于其是否具有降压效果仍存在一定争议。本研究拟探索沙格列汀的降压效果及机制。

1材料与方法

1.1实验动物选择SPF级成年雄性自发性高血压大鼠(SHR)30只及同周龄的健康雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠15只(石河子大学动物实验中心提供)，体质量200～250 g。于动物实验室以普通饲料适应性饲养3 d，自由饮食。室温(23.0±2.0)℃，自然光照。

1.2动物分组与处理将30只SHR按随机数字表法分为干预组和对照组，每组15只。干预组大鼠每天给予沙格列汀灌胃处理10 mg/kg，同期以等体积超纯水予对照组及WKY组，均持续8 w。

1.3指标与方法

1.3.1尾动脉收缩压(SBP)的测量固定大鼠尾部，白炽灯照射尾动脉10～20 min以舒张尾部血管。采用无创伤血压测定仪(ZH-HX-Z，上海软隆科技)和MedLab生物信号采集处理系统测量和采集大鼠清醒、安静状态下的动脉压及脉搏曲线，在出现第1个脉搏波时打气，使尾动脉血流渐进式中断后放气，待第1个脉搏波再次出现时记录此时的血压值，即为SBP。取3次测量平均值为最终血压，每隔2 w测量1次。

1.3.2主动脉病理形态学改变8 w后，禁食12 h，自由饮水。腹腔注射10%的水合氯醛麻醉大鼠，仰卧固定，5%碘酊消毒后打开腹腔，暴露主动脉，手术剪分离1 cm的胸主动脉，用PBS缓冲液冲洗干净。分别经10%甲醛固定、乙醇脱水、透明、浸腊、包埋后，制成厚度约4 μm的连续切片，烤干后行苏木素-伊红(HE)染色，显微镜下观察主动脉的病理形态学变化。

1.3.3血浆GLP-1、内皮素(ET)-1和一氧化氮(NO)的测定处死大鼠后心脏穿刺采集3 ml全血，4℃ 4 000 r/min离心20 min，去上清，-80℃冻存。分别采用放射免疫法GLP-1试剂盒(北京东亚免疫技术研究所)和酶联免疫法ET-1试剂盒(美国R&D公司)及硝基还原法NO测试试剂盒(南京建成生物工程研究所)检测血浆中的GLP-1、ET-1和NO水平，所有操作均严格按照试剂盒要求进行。

1.4统计学方法应用SPSS14.0软件，计量资料采用单因素方差分析进行三组均数的比较，两两均数的比较采用SNK-q检验。

2结果

2.1三组大鼠处理前后SBP比较处理前干预组与对照组SBP比较无差异(P>0.05)，而均高于同期WKY组(P<0.05)。WKY组大鼠处理前后比较无差异(P>0.05)，对照组SBP随处理时间的延长逐渐升高，而干预组逐渐降低(P<0.05)，且干预组均低于同期对照组(P<0.05)。见表1。

2.2三组大鼠主动脉病理形态学改变WKY组主动脉血管内膜完整、光滑，中膜处弹性纤维以同心圆状整齐排列，平滑肌细胞排列规则，无增生、肥大；对照组主动脉内膜呈轻度增生，部分内膜脱落，中膜处弹性纤维排列紊乱，部分可见断裂，平滑肌细胞增生肥大，血管壁增厚；干预组主动脉内膜较平滑，中膜处弹性纤维排列较整齐，平滑肌细胞增生肥大及管壁增厚现象有所减轻。

2.3三组大鼠血浆GLP-1、ET-1和NO水平比较干预组大鼠的血浆GLP-1水平均显著高于WKY组及对照组(P<0.05)，而WKY组与对照组比较无差异(P>0.05)。对照组和干预组的ET-1水平较WKY组明显升高，NO水平明显降低，而干预组与对照组相比ET-1水平更低、NO水平更高(P<0.05)。见表2。

表1　三组大鼠处理前后SBP的变化比较

与同期WKY组比较:1)P<0.05；与同期对照组比较:2)P<0.05；与同组处理前比较:3)P<0.05

表2　三组大鼠的血浆GLP-1、ET-1和NO水平比较

与WKY组比较：1)P<0.05；与对照组比较：2)P<0.05

3讨论

高血压是一种以体循环动脉血压升高为主要特征的全身性慢性疾病，常伴发主动脉、心脏、脑等重要靶器官的损害及其并发症〔3〕。随着生活水平的提高，人们的生活方式和饮食习惯发生了巨大变化，同时加上生活压力的增大和人口老龄化的发展，我国高血压的发生率俱增〔4〕，对患者生命健康产生严重威胁。关于高血压的产生机制中，内皮功能异常学说得到广泛认可〔5〕，其认为内皮合成的大量血管活性物质对维持血管床和外周阻力的平衡具有重要作用，而其功能紊乱将引起内皮细胞源性的缩血管因子及舒血管因子失衡，从而导致血管收缩、血压升高。ET-1和NO是两种重要的血管活性物质，具有不同的血管调节作用。ET-1作为内皮细胞产生的一种生物活性肽，具有强烈持久的血管收缩效应和促平滑肌细胞的增生的作用。其途径与ET-1促进平滑肌血管紧张素Ⅱ的释放和激活丝裂原活化蛋白激酶的活性有关〔6〕。NO具有防止内皮损伤、抑制平滑肌增生及动脉硬化形成等作用；同时还可通过活化平滑肌细胞内的鸟苷酸环化酶，增加Ca2+浓度，使平滑肌松弛，扩张血管、降低血压〔7〕。

高血压的治疗药物多样，为了达到良好的降压目标或降低不良反应，临床上往往采用两种或多种药物的联合治疗〔8〕。目前关于DPP-4酶抑制剂沙格列汀的降血压作用引起学者的关注〔9〕。本研究结果显示，沙格列汀对SHR具有一定的降压作用，但其降压效果有限。

从内皮功能调节的角度分析其降压作用机制。首先，对主动脉的病理形态学观察可见，干预组的主动脉与对照组相比，其平滑肌细胞增生肥大及管壁增厚现象有所改善。提示沙格列汀对高血压引起的内皮结构紊乱具有一定的修复作用。其次，本研究发现沙格列汀在动物体内发挥DDP-4抑制作用，可能以ET-1和NO为靶点而发挥降压作用。本次研究结果与邵宇等〔10〕的研究结果相符。因此本研究认为沙格列汀可通过抑制内皮细胞中ET-1的释放和促进NO的合成，从而修复损伤的内皮细胞、抑制平滑肌细胞增生等，最终恢复血管的血压调节功能。

4参考文献

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3农彩丽，韦锦斌.高血压并发症动物模型研究进展〔J〕.医学综述，2013；23(19)：4287-90.

4Wang J，Zhang L，Wang F，等.中国高血压发病率、知晓率、治疗率和控制率的全国性调查结果〔J〕.中华高血压杂志，2015；23(3)：298.

5毛文星，李冰，王志梅，等.氧化应激、血管内皮功能障碍与高血压〔J〕.现代生物医学进展，2014；14(19)：3770-4.

6Lytsy P，Lind L，Sundstrom J.Endothelial function and risk of hypertension and blood pressure progression：the prospective investigation of the vasculature in Uppsala seniors〔J〕.J Hypertens，2013；31(5)：936-9.

7Ahmed LA，Obaid AA，Zaki HF，etal.Role of oxidative stress，inflammation，nitric oxide and transforming growth factor-beta in the protective effect of diosgenin in monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats〔J〕.Eur J Pharmacol，2014；740(4)：379-87.

8张宜锦.高血压治疗方法的分析〔J〕.中国中医药资讯，2012；4(3)：483.

9Solun B，Marcoviciu D，Dicker D.Dipeptidyl peptidase-4 inhibitors and their effects on the cardiovascular system〔J〕.Curr Cardiol Rep，2013；15(8)：1-8.

10邵宇，王孝萍，杨生平，等.沙格列汀对自发性高血压大鼠血压的影响〔J〕.宁夏医学杂志，2015；37(2)：117-9.

〔2015-12-18修回〕

(编辑袁左鸣)

〔中图分类号〕R54

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)12-2850-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.010

第一作者：殷音(1979-)，女，主治医师，主要从事心内科临床研究。