刘 径，张珂恒，曾永三



昆虫病原线虫Oscheius myriophila共生细菌菌株B1的分离与鉴定

刘 径，张珂恒，曾永三

（仲恺农业工程学院植物保护系，广东 广州510225）

摘 要：从昆虫病原线虫（Oscheius myriophila）华农种群HN体内分离得到1株共生细菌B1。该菌株在NA培养基上形成的菌落为圆形，白色，表面光滑，不透明，隆起，边缘整齐；革兰氏阴性，短杆状，单鞭毛，有荧光。Biolog检测结果显示B1为沙雷氏菌（Serratia sp.）；用引物27F/1492R进行 PCR 扩增，得到B1的16S rDNA扩增产物大小为 1 445 bp。Blast搜寻和比对结果表明，该菌株16S rDNA序列与所选的17个嗜线虫沙雷氏菌（S. nematodiphila）的相似度达97%～100%，并以高置信度（99）与这17个嗜线虫沙雷氏菌种群及4个粘质沙雷氏菌（S. marcescens）种群聚于1个单支系中。综合形态和16S rDNA序列特征以及Biolog检测结果，将共生细菌B1鉴定为嗜线虫沙雷氏菌（Serratia nematodiphila）。

关键词：共生细菌； 昆虫病原线虫 Oscheius myriophila； 16S rDNA；嗜线虫沙雷氏菌

昆虫病原线虫共生菌发现于20世纪60年代，属于肠杆菌科 （Enterobacteriaceae） 细菌。目前已报道的昆虫病原线虫共生菌包括致病杆菌（Xenorhabdus sp.）［1］和光杆状菌（Photorhabdus sp.）［2］及沙雷氏菌（Serratia sp.）［3］，它们分别与斯氏线虫属（Steinernema）和异小杆线虫属（Heterorhabditis）及小杆线虫属（Oscheius 或Rhabditis）共生。共生细菌存在于三龄侵染期线虫的肠道内，在昆虫血腔内繁殖，产生毒素并分解昆虫的营养物质，使其患败血症死亡［4-5］。目前国内外学者已经认识到此类共生细菌是一种抑菌［6］，是具有医药价值［7］的生物资源。在共生细菌的传统分类鉴定中，菌株间形态和生理生化指标上的高度相似性，造成了分类鉴定的困难。近年来，16S rDNA 序列分析在昆虫病原线虫共生细菌分类鉴定上的应用［8-9］，促进了共生细菌的分类和鉴定，已成为细菌系统分类研究中最常用也是最有效的分子标记。……