西安市儿童医院病理科(西安 710002)　陈广生　安　鲁　李　娟　张　强　惠军朋



·临床病理·

Axin基因对人肾母细胞瘤细胞生物学特性的影响*

西安市儿童医院病理科(西安 710002)陈广生安鲁李娟张强惠军朋

摘要目的：研究Axin基因对人肾母细胞瘤细胞G401生物学特性的影响为人肾母细胞瘤的分子病理机制及治疗、预后提供基础研究依据。方法：采用基因工程的方法构建含 Axin基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin，稳定转染G401细胞，建立高表达的G401细胞系。用MTT实验、克隆形成能力实验、侵袭能力实验三种方法检测 Axin基因对G401细胞生物学特性的影响。结果：重组载体pIRES2-EGFP-Axin经PCR和双酶切鉴定结果显示：在约2500 bp大小处出现一条特异性条带，转染G401细胞后，经Western blotting结果显示：Axin蛋白在G401细胞中成功表达，同时，转染了pIRES2-EGFP-Axin质粒的G401细胞生长速度显著减慢(P<0.05)；G401细胞的克隆形成能力和侵袭力均显著降低(P<0.05)。结论：我们成功构建了重组真核表达载体PIRES2-EGRP-Axin，且通过Western blotting 检测筛选获得稳定转染的G401细胞系，最后Axin体外实验对G401细胞生物学特性影响表明：Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系。

主题词肾母细胞瘤/治疗基因/治疗应用细胞分裂@ Axin@ G401

在1997年对天然突变系小鼠基因分析中发现了基因Axin (Axis formation inhibition)[1]。 由于Axin能够下调β-catneni的水平而被视为一种肿瘤抑制因子[2]。 后来人们发现了与Axin同源的蛋白，为Conductin(又称Axi l和Axin 2)，与Axin有着相似的生物学功能[3]。Axin与许多人类肿瘤的发生发展有着密切的关系。肾母细胞瘤(Nephroblastoman)是婴幼儿最多见的恶性实体瘤之一，具有较高的致死率，是导致儿童因肿瘤死亡的主要肿瘤之一 ，其发病原因目前尚不清楚，但有证据表明肾母细胞瘤的形成可能与一定的内环境改变和基因变异有关。有关Axin在肾母细胞瘤发生发展中的作用及其机制研究，在国内外尚未见相关研究。国外研究发现：在儿童肾母细胞瘤中发现有Axin1基因的缺失或突变或杂合性消失，提示Axin基因与肾母细胞瘤的发生发展有一定关系[4]。……