李军亮， 吴登龙， 黄盛松， 卞崔冬， 袁 涛， 桂亚平

(同济大学附属同济医院泌尿外科，上海 200065)



·基础研究·

miRNA-29a调控H3K4甲基化在前列腺癌病理机理中的作用

李军亮， 吴登龙， 黄盛松， 卞崔冬， 袁 涛， 桂亚平

(同济大学附属同济医院泌尿外科，上海 200065)

目的 探讨在前列腺癌中miR-29a与H3K4特异性去甲基化酶—KDM5B之间的关系，验证miR-29a通过调控KDM5B的表达来抑制前列腺癌细胞的增殖并诱导其凋亡。方法 将miR-29a模拟物(miR-29a mimic)片段和含野生型KDM5B基因3′-非翻译区的荧光素酶报告载体(KDM5B-wt)共转染至前列腺癌PC3和Lncap细胞后，进行荧光素酶活性检测。采用脂质体转染法将miR-29a mimics转染入人前列腺癌PC3和Lncap细胞中，MTT实验检测细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡；Real-Time PCR和Western印迹法检测KDM5B表达水平。结果 转染miR-29a mimics后，KDM5B的表达被明显抑制 (P<0.01)，蛋白表达水平也明显低于NC组。与NC组相比，转染miR-29a mimics组细胞增殖能力显著降低(P<0.01)，细胞生长被阻滞在S/G2期，细胞凋亡率较NC组增加(P<0.01)。结论 miR-29a可以通过调控H3K4特异性去甲基化酶-KDM5B的表达而抑制前列腺癌PC3和Lncap细胞的增殖。miR-29a有希望成为诊断和治疗前列腺癌新的分子标记和靶点。

前列腺肿瘤； miRNA-29a； KDM5B基因； 去甲基化酶

前列腺癌( prostate cancer， PCa)是威胁男性健康的常见肿瘤之一。微小RNA(microRNA，miRNA， miR) 目前已经成为肿瘤研究的热点，最近越来越多的证据表明miRNA的异常表达与肿瘤的形成、恶性增殖和转移等有关[1]，其主要作用是在转录后水平对基因表达进行负调控，降解mRNA或阻碍其翻译[2]。研究表明，miR-29a 在前列腺癌组织及细胞中的表达下调，并且抑制肿瘤细胞的增殖[3]。研究发现，KDM5B是组蛋白H3第四位赖氨酸(H3K4)的特异性去甲基化酶, KDM5B的过表达可以使得H3K4甲基化水平下降，但不影响其他组蛋白赖氨酸甲基化状态；KDM5B在前列腺癌组织中高表达[4]。通过在线软件预测发现，KDM5B是miR-29a 调控的一个靶基因。本研究拟从分子水平探讨miR-29a如何调控KDM5B，改变H3K4甲基化状态，进而调控前列腺癌细胞的发生与发展。……