张金丽， 曹雯娟， 熊喜峰， 刘志河



实验研究

穗花杉双黄酮调控人瘢痕成纤维细胞活性及凋亡的研究

张金丽， 曹雯娟， 熊喜峰， 刘志河

目的 探讨穗花杉双黄酮调控人增生性瘢痕成纤维细胞生长与凋亡的作用机制。方法 将细胞接种于24孔板，分别加入不同浓度的穗花杉双黄酮(0、25、50、100、150、200 μmol/L), 48 h后,酶标仪检测490波长的吸光度。选取浓度为50 μmol/L和100 μmol/L的穗花杉双黄酮作为后续实验的用药浓度，以0 μmol/L穗花杉双黄酮为对照，加入到人增生性瘢痕成纤维细胞中作用48 h，分别采用DAPI染色检测穗花杉双黄酮对人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用， Western blot检测穗花杉双黄酮对人增生性瘢痕成纤维细胞磷酸化AKT(p-AKT)及凋亡相关蛋白，如翻译控制肿瘤蛋白、BAX、caspase 3、caspase 8、caspase 9的影响。结果 穗花杉双黄酮对人增生性瘢痕成纤维细胞的活力具有剂量依赖性抑制作用，穗花杉双黄酮浓度为50 μmol/L以上与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。DAPI染色显示，穗花杉双黄酮具有诱导人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的趋势，与对照组相比，加药组细胞表现为细胞核深染、核膜皱缩、有凋亡小体形成。Westernblot显示，与对照组相比，AKT磷酸化水平降低；促凋亡蛋白BAX表达升高；抗凋亡蛋白TCTP表达降低；caspase3、caspase8、caspase9表达升高。结论 穗花杉双黄酮可诱导瘢痕成纤维细胞凋亡，抑制其活力，有望成为临床治疗增生性瘢痕的一种有效药物。

增生性瘢痕； 成纤维细胞； 凋亡； 穗花杉双黄酮； 实验研究

增生性瘢痕是烧伤患者受伤后伤口修复过程中常见的并发症。随着医疗技术的进步，伤后患者的生存率得到了很大的提高，但形成的增生性瘢痕却严重影响患者的生活质量和心理健康[1]。增生性瘢痕是因成纤维细胞增殖生长失控、胶原过度沉积导致受伤部位异常愈合而形成，其中成纤维细胞的异常增殖在瘢痕的形成中起主要的作用[2]。目前，增生性瘢痕的治疗仍以激素为主，同时还有5- 氟尿嘧啶、免疫调节剂等其他药物，但治疗效果各有利弊[3]。……