粪便和精液中检出溶组织内阿米巴滋养体各1例*

2016-07-15黄学贵幸建英贺莉芳

重庆医学 2016年16期

关键词：精液粪便

黄学贵，幸建英，刘　晖△，贺莉芳

(1.遵义医学院寄生虫学教研室，贵州遵义 563003；2.遵义医学院附属医院检验科，贵州遵义 563003)

粪便和精液中检出溶组织内阿米巴滋养体各1例*

黄学贵1，幸建英2，刘晖1△，贺莉芳1

(1.遵义医学院寄生虫学教研室，贵州遵义 563003；2.遵义医学院附属医院检验科，贵州遵义 563003)

[摘要]目的病原学检出粪便和精液中溶组织内阿米巴滋养体各1例，观察标本中滋养体形态学特点，为病原学诊断提供参考。方法挑取黏液血便和经稀释后血性精液，置于37 ℃恒温箱孵育5 min后行常规直接涂片检查；精液标本涂片后行瑞氏和铁苏木素染色。结果粪便标本镜下见红细胞成堆聚集，白细胞数较少；滋养体直径大于红细胞数倍，胞内见吞噬的红细胞；滋养体形态多变，以伪足作缓慢运动。精液直接涂片法未见滋养体伪足运动，但形状会发生缓慢变化。染色后见单个胞核的虫体，核浆比小，核仁居中，胞质内有空泡状结构。结论粪便标本经37 ℃孵育后易观察到滋养体活动，可提高检出率；精液直接涂片法因精子活动干扰不易观察到伪足运动，需结合瑞氏和铁苏木素染色进行诊断。

[关键词]粪便；精液；滋养体；溶组织内阿米巴

溶组织内阿米巴主要寄生于患者结肠，也可寄生于肝、肺、脑等肠外组织，偶可寄生于泌尿生殖道。肠阿米巴病患者常引起腹痛、腹泻、里急后重，粪便呈果酱色的黏液血便等临床表现，需与细菌性痢疾进行鉴别诊断。稀便和黏液血便中滋养体多见，粪便检查仍为最有效的病原学诊断方法。因溶组织内阿米巴滋养体形态多变且新鲜粪便标本没有染色，检验者需具一定的工作经验才能做出快速的正确判断[1]。近年来我国急性阿米巴痢疾和肝脓肿病例较少见，但仍有散发病例。现总结临床粪便和精液标本中各1例的溶组织内阿米巴滋养体形态特点，为实验室检验人员提供其病原学诊断资料和经验。

1资料与方法

1.1一般资料(1)患儿，女，10岁，因腹痛、腹泻、血便就诊。粪便用洁净容器盛取快速送检，外观呈暗红色果酱样，含血液及黏液，有特殊腥臭味；(2)患者，男，23岁，因血性精液就诊,精液外观呈暗红色，无消化道症状，有不洁性交史。

1.2方法

1.2.1粪便检查取1片凹玻片内放入生理盐水，挑取少量黏液血便混匀，置于37 ℃恒温箱孵育5 min后镜检。

1.2.2精液检查精液经生理盐水稀释10倍后置于37 ℃恒温箱孵育5 min直接涂片镜检，然后行瑞氏和铁苏木素染色镜检。

2结果

2.1粪便直接涂片法低倍镜下见大量红细胞聚集成堆，白细胞数较少，可见许多较红细胞直径大于数倍的溶组织内阿米巴滋养体。高倍镜下见大而圆的滋养体，直径为18～50 μm不定，有透明的外质和富含颗粒的内质，内、外质分明；有的滋养体内隐约可见一个细胞核，核浆比小于宿主细胞，有的滋养体胞质内可见吞噬的红细胞(图1、2)。形态多变，可见滋养体伸出单一伪足，作缓慢的定向运动，易于诊断(图3)。

2.2精液检查

2.2.1直接涂片法镜下见少量红细胞和直径20 μm左右的虫体，因精子活动非常活跃，经37 ℃恒温箱孵育5 min后涂片的标本中未能见明显的滋养体伪足运动，但其形状会发生缓慢变化，见图4。

图1红细胞聚集成堆，见大量溶组织内阿米

巴滋养体(×100)

图2　溶组织内阿米巴滋养体内外质分明，虫体内隐约

图3　恒温箱孵育后溶组织内阿米巴滋养体虫体形态多变，

2.2.2瑞氏和铁苏木素染色瑞氏染色后见单个核的虫体，胞质染成紫蓝色、核染成红色，核浆比小，细胞质内有空泡状结构(图5)；经铁苏木素染色后见可核仁居中，见图6。

图4　精液直接涂片法标本中同一虫体的形状发生缓慢

图5　瑞氏染色见单个核的虫体，核浆比小，胞质内有

图6　铁苏木素染色见虫体核仁居中(×1 000)

3讨论

溶组织内阿米巴病是一种常见病和多发病，分布遍及全球，感染率高低与社会经济水平、卫生条件及生活习惯有关。热带与亚热带地区为高发区，少数热带不发达国家居民感染率估计达50%。据1988～1992年调查，我国平均感染率为0.949%，贵州省感染率为2.25%[2]。近年来我国急性阿米巴痢疾和肝脓肿病例较少见，但仍有散发病例，本院已近10年未诊断该病；厦门市同安区2005～2011年诊断阿米巴痢疾发病数177例，发病率2.7～16.0/10万[3]；云南省寄生虫病防治所等部门2008年8～10月在中缅边境(西段)整群随机抽样云南省6个自然村，感染率为15.17%[4]。目前，肠道溶组织内阿米巴病的病原学诊断主要采用显微镜检查法、体外培养法、核酸诊断法等。体外培养法操作时间长，技术要求高，且检出率低；采用PCR等技术检测粪便标本，对实验技术要求高，成本费用较高，特别是在一些仪器设备较差的基层医院推广使用较难。刘慧等[5]比较3种方法检测粪便中的溶组织内阿米巴，其中生理盐水直接涂片法因操作简单、费时最短、特异性较高，虽敏感性稍低，但每份标本重复3次检查可弥补。

对急性肠阿米巴病进行临床诊断，检获滋养体是确诊依据，其中生理盐水直接涂片法因操作简便快速是临床最常用的检查方法[6]。因阿米巴滋养体体外易死亡而影响诊断，所以粪便标本一定需保温、避免污染、快速送检。典型的急性肠阿米巴病粪便呈暗红色果酱样，腥臭，含黏液、血液，生理盐水涂片镜检可见大量红细胞，因阿米巴滋养体可迅速触杀白细胞，故标本中仅见少量白细胞，此特点是与细菌性痢疾鉴别诊断的依据之一。直接涂片法观察到的溶组织内阿米巴滋养体较红细胞直径大数倍，细胞质中可含吞噬的红细胞。溶组织内阿米巴滋养体对温度敏感，排出后如温度低而虫体固定不动呈圆形，不易观察到伸出的伪足，可将生理盐水加温至37 ℃观察，提高检出率[7]。笔者将黏液血便放入加有生理盐水的凹玻片内，37 ℃恒温箱孵育5 min，溶组织内阿米巴滋养体形态多变，可见以伪足进行单一定向运动，具有明确诊断意义。

近年来溶组织内阿米巴的感染率在男性同性恋中呈上升趋势，因不洁性交方式可造成感染[8]，偶可寄生于泌尿生殖道。Abdolrasouli等[9]报道从4例有肛交性行为患者的生殖器溃疡检获溶组织内阿米巴滋养体。因感染部位较罕见，精液中发现溶组织内阿米巴滋养体非常少见[10]。本病例精液标本经37 ℃恒温箱孵育5 min后涂片，因精子活动干扰未见明显的滋养体伪足运动，诊断有困难，需结合流行病学史和瑞氏、铁苏木素染色进行诊断。

参考文献

[1]刘连清.阿米巴痢疾实验诊断的误诊预防[J].中国误诊学杂志,2004,4(10):1724-1725.

[2]蒋则孝,许隆祺,余森海.中国溶组织内阿米巴感染的状况[J].中国寄生虫病防治杂志,1997,10(4):264-268.

[3]张怡盾，郭志南，荣飚.厦门市同安区2005～2011年阿米巴痢疾监测分析[J].海峡预防医学杂志，2012，18(6)：40-41.

[4]孙晓东,邓艳,王剑，等.中缅边境(西段)阿米巴病流行现状调查 [J].中国病原生物学杂志，2012，7(1)：56-57.

[5]刘慧，孙晓东，聂仁华，等.3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的结果比较[J].中国病原生物学杂志，2008,3(9)：679-680,689.

[6]王爱华，包东武.18例溶组织内阿米巴致肝脓肿误诊分析[J].现代预防医学，2008,35(18)：3623-3624.

[7]吴观陵.人体寄生虫学[M].3版.北京：人民卫生出版社，2005：162-163.

[8]李雍龙.人体寄生虫学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2008：32-33.

[9]Abdolrasouli A,de Vries HJ,Hemmati Y,et al.Sexually transmitted penile amoebiasis in Iran:a case series[J].Sex Transm Infect,2012,88(8):585-588.

[10]傅振荣.精液中检出溶组织内阿米巴原虫1例报告[J].河北中西医结合杂志，1996,5(3):55.

doi:·经验交流·10.3969/j.issn.1671-8348.2016.16.029