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水热法制备磁性微球及其在植物基因组DNA提取分离中的应用

2016-07-15孙培培张富昌

安徽农业科学 2016年13期

杜 鲜,孙培培,张 虹,张富昌,石 峰

(石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000)



水热法制备磁性微球及其在植物基因组DNA提取分离中的应用

杜 鲜,孙培培,张 虹,张富昌,石 峰*

(石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000)

摘要[目的]建立一种适用于多种植物组织快速提取基因组DNA的方法。[方法]以水热反应制备出Fe3O4磁性纳米微球,并对其粒径、形貌、磁学性质等进行表征分析,并以此作为核酸提取载体,对多种新疆特色经济作物和植物的叶片、根、茎、籽粒等组织进行DNA的提取分离,并优化分离纯化过程的各环节。[结果]通过OD260紫外吸收值的检测、琼脂糖凝胶电泳,结果显示,用该方法纯化得到的植物基因组DNA纯度高、完整性好,能够满足下游分子生物学操作对基因组DNA质量的要求。[结论]建立了一种简便、快速、普适的从多种植物组织中获得高产量和高纯度的基因组DNA,为全自动化、规模化提取DNA提供了理论和实践基础。

关键词磁性纳米微球;水热法;基因组DNA;纯化;植物组织

随着植物分子生物学的快速发展,用简便、快速、普适的方法从多种植物组织中获得高产量和高品质的基因组DNA,是核酸提取需要解决的关键问题[1]。在新疆特殊生境下,极端抗逆植物蕴含丰富的宝贵基因资源,对其基因组DNA的高质量提取纯化对后期的基因克隆、转基因育种起着重要的作用,然而新疆特殊生境下的植物含有大量的多糖、多酚、色素等次生类物质,用快速简便的方法提取高质量、高纯度的DNA较为困难[2-3]。……

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