董利平　崔玉环　赵宝民　连晶晶　魏玉磊　颜　娟　郑茂东　刘占矿

河北北方学院附属第一医院(张家口 075000)



柴胡皂苷d联合黄芩苷对大鼠脑缺血/再灌注损伤中PARP-1表达的影响*

董利平崔玉环赵宝民连晶晶魏玉磊颜娟郑茂东刘占矿△

河北北方学院附属第一医院(张家口 075000)

摘要目的：探讨柴胡皂苷d联合黄芩苷对二磷酸腺苷核糖多聚酶-1(Poly(ADP-ribose)polymerase-1，PARP-1)表达的影响。方法：将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、PARP-1抑制剂PJ34组、柴胡皂苷d组、黄芩苷组、柴胡皂苷d+黄芩苷组，按再灌注时间点不同分为6h、12h、24h、48h、72h五个亚组；应用修饰酶循环法检测NAD+浓度，定量RT-PCR技术检测PARP-1 mRNA表达。结果：模型组NAD+浓度较假手术组明显降低(P<0.01)，PARP mRNA表达显著增加(P<0.01)，于再灌注24 h达高峰；药物干预组NAD+浓度较模型组显著增加(P<0.01)，PARP mRNA表达显著降低(P<0.01)，并于24h表达最低(P<0.01，P<0.05)，且柴胡皂苷d+黄芩苷组效果最为显著(P<0.01)。结论：我们推测柴胡皂苷d联合黄芩苷可能是通过抑制MCAO大鼠PARP-1表达，降低NAD+消耗，实现其对大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。

主题词脑缺血/中医药疗法动物，实验大鼠

脑缺血/再灌注损伤中PARP-1过度激活可导致NAD+大量耗竭、ATP减少，最终细胞能量耗竭，细胞死亡[1]。文献报道早期给予PARP-1抑制剂可阻断PARP-1酶活性，减轻缺血/再灌注中神经元的损伤[2]。因此本研究选取柴胡皂苷d和黄芩苷，通过建立大鼠脑缺血/再灌注损伤模型，检测药物对脑缺血/再灌注病灶中PARP-1及NAD+的表达情况，探讨其在脑缺血/再灌注损伤中的神经保护机制。

1材料与方法

1.1实验动物与分组SD(Sprague-Dawley)大鼠420只，健康雄性，体质量(240±5)g，购自北京大学实验动物科学部，随机将大鼠分成正常组、假手术组、模型组、PARP-1抑制剂PJ34组、柴胡皂苷d组、黄芩苷组、柴胡皂苷d+黄芩苷组7组，每组60只，按再灌注时间点不同分为6h、12h、24h、48h、72h五个亚组。

1.2药物与试剂PARP-1抑制剂PJ34(美国Santa Cruz公司)；柴胡皂苷d(Sigma-Aldrich公司)；黄芩苷(Sigma-Aldrich公司)；栓线(北京沙东生物技术有限公司)，试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)；……