张 莹， 王 璐， 刘利敏， 张 颖， 石 静， 林 清

(1. 同济大学附属第十人民医院肿瘤放射治疗科，上海 200072； 2. 上海市宝山区中西医结合医院普外科，上海 201999)



·基础研究·

X射线对人三阴性乳腺癌细胞E-钙黏蛋白基因表达的影响

张 莹1， 王 璐1， 刘利敏2， 张 颖1， 石 静1， 林 清1

(1. 同济大学附属第十人民医院肿瘤放射治疗科，上海 200072； 2. 上海市宝山区中西医结合医院普外科，上海 201999)

目的 研究不同剂量X射线照射人三阴性乳腺癌细胞，照射后不同时间点对人三阴性乳腺癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)基因表达的影响。方法 用X射线分2.5、5和10Gy 3个吸收剂量组照射体外培养的人三阴性乳腺癌HCC1937细胞和MDA-MB-231细胞，采用荧光实时定量PCR技术检测HCC1937细胞和MDA-MB-231细胞经照射后6、12、24和48h的E-cadherin mRNA表达水平，以未照射组(0h组)为对照。结果 HCC1937细胞和MDA-MB-231细胞E-cadherin mRNA的表达在2.5、5、10Gy X射线照射后，随着时间点的后移呈升高趋势。与未照射组相比，除了HCC1937细胞10Gy照射后6h、2.5Gy和5Gy照射后24h及MDA-MB-231细胞 5Gy 照射后12h外，各时间点差异均有统计学意义(P<0.05)。HCC1937细胞在2.5Gy和10Gy照射后48h，E-cadherin mRNA的表达呈下降趋势，与未照射组相比，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 较大剂量的X射线整体可上调HCC1937细胞和MDA-MB-231细胞E-cadherin mRNA的表达，可能诱导了肿瘤细胞凋亡；晚期HCC1937细胞E-cadherin mRNA的表达下降，可能与辐射所致HCC1937细胞的放射生物学效应有关。

三阴性乳腺肿瘤； E-钙黏蛋白； HCC1937细胞； MDA-MB-231细胞； X射线； 照射

三阴性乳腺癌(three negative breast cancer， TNBC)是雌激素受体(estrogen receptor， ER)、孕激素受体(progesterone receptor， PR)、原癌基因人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2， HER2)均阴性表达的乳腺癌亚型，在所有乳腺癌中占15%～26%[1-2]。三阴性乳腺癌的5年复发或远处转移率(30.8%)明显高于非三阴性(18.7%，P<0.05)，三阴性乳腺癌的5年总生存率(78.4%)明显低于非三阴性(88.1%，P<0.05)[3]。由于TNBC分化差、组织学分级高，因此临床上容易发生复发转移，预后不良。目前TNBC尚缺乏特异性的治疗靶点，不能从内分泌治疗及分子靶向治疗中获益，因此寻找有效的治疗靶点是TNBC治疗的关键。研究[4]发现，约70%的原发性乳腺肿瘤中存在E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达减少甚至缺失，E-cadherin下调是上皮间质化的标志，正是由于E-cadherin的功能缺失导致细胞与细胞之间的黏附力下降，促使上皮间质化的发生，进而引起肿瘤转移。本研究探讨X线辐射对E-cadherin mRNA的表达的影响，从而分析放疗对乳腺癌尤其是TNBC的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞与试剂

HCC1937细胞株和MDA-MB-231细胞株购自中科院上海细胞库，为同济大学附属第十人民医院医院中心实验室常规保存；RNA提取试剂TRIzol购自Invitrogen公司；PrimeScript RT reagent Kit试剂盒购自TaKaRa公司；SYBR FAST qPCR Master Mix试剂盒购自KAPA公司;E-cadherin引物、内参(β-Actin)引物均由上海华大基因研究所合成。……