李俊雯， 杨红彦， 靳令经， 陈轶卉， 聂志余, 黄 敬

(1. 同济大学附属同济医院神经内科，上海 200065； 2. 同济大学附属同济医院分院内科，上海 200092；3. 同济大学附属杨浦医院眼科，上海 200090)



·基础研究·

李俊雯1， 杨红彦2， 靳令经1， 陈轶卉3， 聂志余1, 黄 敬2

(1. 同济大学附属同济医院神经内科，上海 200065； 2. 同济大学附属同济医院分院内科，上海 200092；3. 同济大学附属杨浦医院眼科，上海 200090)

目的 探讨慢性低灌注时，水通道蛋白-4(aquaporin-4， AQP4)的表达与构型变化在血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性增高中的作用。方法 Wistar大鼠采用双侧颈总动脉结扎术(2-vessel occlusion, 2VO)建立慢性低灌注模型，测定2VO术后不同时间点脑组织伊文思蓝(evans blue， EB)含量，评价BBB通透性，RT-PCR和Western印迹法测定不同时间点AQP4 mRNA及蛋白水平表达，免疫荧光双标法观察AQP4的构型变化。结果 2VO术后早期，BBB通透性迅速升高，AQP4 mRNA和蛋白表达水平与BBB通透性变化趋势一致，均在术后3d时达到高峰，1、2周时仍显著升高(P<0.01)，随着慢性缺血时间的延长，无论是BBB通透性还是AQP4 mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低，至3个月时与假手术组相比，差异无统计学意义。而AQP4的功能构型OAPs与BBB通透性变化趋势呈负相关，2VO术后早期AQP4与GFAP共定位明显减少，随后逐渐增多，术后3个月时恢复至正常水平。结论 慢性低灌注状态可引起BBB通透性升高，AQP4的表达与构型改变与BBB通透性密切相关。

慢性低灌注； 血脑屏障； 水通道蛋白-4； 大鼠

血脑屏障(blood-brain barrier， BBB)是维持中枢神经系统内环境稳定的基础，由内皮细胞，星形胶质细胞足突，基膜及其间的紧密连接组成，其结构的完整与功能的维持有赖于内皮细胞及星形胶质细胞表面水通道蛋白-4(aquaporin-4， AQP4)的表达及其活性形式OAPs(orthogonal arrays of particles)的形成[1-2]。目前，关于AQP4的研究主要集中在缺血再灌注损伤或胶质细胞瘤等方面，而慢性低灌注时AQP4是否参与了BBB的损伤、作用机制如何尚未见相关报道。本研究拟通过观察双侧颈总动脉结扎(2-vessel occlusion, 2VO)大鼠BBB通透性改变情况及其与AQP4表达、构型变化之间的关系，探讨AQP4在慢性低灌注时BBB损伤中的作用及其机制。……