张雨莎，　柳　慧，　占秋晓，　吴丰华

湖北中医药大学基础医学院，武汉　430065

姜黄素阻断DAMPs-TLR4信号通路抑制黑色素瘤肺转移的效应及机制*

张雨莎，柳慧，占秋晓，吴丰华△

湖北中医药大学基础医学院，武汉430065

摘要：目的探讨姜黄素抑制黑色素瘤细胞DAMPs-TLR4信号通路的激活，从而抑制黑色素瘤肺转移的效应及机制。方法体外培养小鼠黑色素瘤B16细胞，制备肿瘤损伤分子(DTC-Ms)模拟肿瘤微环境中DAMPs分子混合培养，并加入最佳工作浓度姜黄素处理，CCK8细胞活性试剂盒检测细胞活性；CFSE标记B16细胞，尾静脉注射接种，分别在接种后6 h和24 h取肺组织做冰冻切片，观察各组细胞在肺部聚集和对肺组织侵袭情况；接种后15 d解剖小鼠取肺，观察B16细胞在肺表面形成转移结节数量差异；Zymography法检测肿瘤细胞分泌MMP-9水平；Western blot检测肿瘤细胞TLR4信号通路的关键分子表达。结果姜黄素能有效逆转DTC-Ms刺激所致的细胞活性增强及体内转移能力增强的效应，抑制DTC-Ms刺激所致的肿瘤细胞MMP-9和Pro-MMP-9分泌增多的生物学效应，并能明显抑制DTC-Ms刺激下肿瘤细胞TLR4信号通路的激活。结论姜黄素能阻断DAMPs对黑色素瘤细胞TLR4信号通路的激活，抑制实验性黑色素瘤肺转移。

关键词：姜黄素；损伤相关分子模式；肿瘤转移；Toll样受体

肿瘤细胞的非程序性死亡会向肿瘤微环境中释放大量的损伤相关分子模式(Damage-associated molecules pattern，DAMPs)分子，如HMGB1、HSPs、S100家族等。这些成分通常只存在于胞质，释放致胞外被免疫细胞识别后，能启动机体保护性免疫应答，起到免疫监视和免疫自稳的作用[1]。但是，在复杂的肿瘤微环境中，DAMPs的存在却可能起到帮助肿瘤生长和转移的作用[2-3]。……