潘兴飞，　孙媛丽，　贺　琪，　尹旺春，　符明鹏，　沈关心，　朱慧芬△

1广州医科大学附属第三医院感染科，广州　510150　2 华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系，武汉　430030

IL-32对HepG2 2.15细胞凋亡的影响*

潘兴飞1，孙媛丽2，贺琪2，尹旺春2，符明鹏2，沈关心2，朱慧芬2△

1广州医科大学附属第三医院感染科，广州5101502华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系，武汉430030

摘要：目的研究白细胞介素-32(IL-32)对乙型肝炎病毒(HBV)感染的肝细胞(HepG2 2.15细胞，插入HBV全基因组，持续表达)凋亡的影响。方法将不同浓度的IL-32(0～0.4 μg/mL)蛋白质与HepG2细胞、HepG2 2.15细胞共培养，48 h后用MTT检测细胞增殖。收集与IL-32共培养48 h的HepG2细胞、HepG2 2.15细胞，加入Annexin Ⅴ和PI，室温避光孵育15 min，流式细胞仪检测细胞凋亡。将IL-32(0.2 μg/mL)与HepG2细胞、HepG2 2.15细胞共培养，分别于0、12、24 h后收集细胞，Human Active Caspase-3 Immunoassay检测试剂盒检测活化的Caspase-3表达水平，Caspase-3 Colorimetric检测试剂盒检测Caspase-3酶活性。结果IL-32抑制HepG2细胞、HepG2 2.15增殖，诱导HepG2细胞、HepG2 2.15细胞凋亡，且随着IL-32浓度的增高，细胞凋亡水平亦增高。IL-32诱导HepG2细胞、HepG2 2.15细胞活化的Caspase-3表达水平及Caspase-3酶活性均增加。结论IL-32可能通过活化Caspase-3通路诱导HBV感染的肝细胞凋亡而发挥抗病毒作用，同时亦参与慢性乙型病毒性肝炎肝损伤的发生。

关键词：白细胞介素-32；肝细胞；乙型肝炎病毒；细胞凋亡；Caspase-3

白细胞介素-32(interleukin-32，IL-32)是一种促炎症细胞因子，可以通过活化NF-κB、p38MAPK等信号通路诱导TNF-α、IL-8、IL-1β、等细胞因子表达[1]，导致细胞因子网络活化，亦可影响细胞的生长、凋亡。研究发现IL-32可以诱导活化的T细胞凋亡，HeLa细胞中IL-32增高则HeLa细胞凋亡增加，降低HeLa细胞中的IL-32则HeLa细胞凋亡减少[2-3]。我们前期研究证实慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B，CHB)肝组织中IL-32表达增高，且其表达水平与肝组织炎症、纤维化程度呈正相关[4]。……