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羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR检测方法建立及初步应用

2016-07-05郭海龙

中兽医学杂志 2016年5期
关键词:检测方法

常 亮,党 岩,郭海龙

(甘肃省畜牧兽医研究所,甘肃平凉744000)

羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR检测方法建立及初步应用

常 亮,党 岩,郭海龙

(甘肃省畜牧兽医研究所,甘肃平凉744000)

以GenBank上羊接触传染性脓疱皮炎病毒(ORFV)B2L基因序列,用Primer premier 5.0软件设计1对引物并合成,经PCR条件优化,确定了最佳的PCR反应条件,建立了羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR检测方法。结果显示,设计的引物能扩增出的PCR产物为540bp左右,与预期大小一致;同时检测山羊痘病毒,结果均为阴性;该方法能检出羊接触传染性脓疱皮炎病毒最低量为5pg。经证实,建立起羊接触传染性脓疱皮炎病毒PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床病料检测。

羊接触传染性脓疱皮炎病毒;PCR;特异性;灵敏度

羊接触传染性脓疱皮炎,又称羊传染性脓疱皮炎、羊传染性脓疮、羊口疮,是由羊传染性脓疱病毒又称羊口疮病毒感染引起绵羊、山羊的接触性、嗜上皮性传染病[1],以口唇等处的皮肤和粘膜形成丘疹、脓疱、溃疡和结成疣状厚痂为特征,羊群的发病率高达90%,病死率1%-25%[2],给养羊业造成了巨大的经济损失。人、犊牛、骆驼等也可感染本病。目前本病诊断有电子显微镜检查、病毒分离、接种试验和AGP等方法[3-7]。由于本病与羊感染口蹄疫病毒、羊痘病毒临床症状相似,特别在继发感染或混合感染难以区分,这就为本病的确诊增加了难度。为了准确、快速检测本病,本研究建立了羊传染性脓疱皮炎病毒PCR方法,经初步应用取得良好的检测效果。……

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