张武圣

摘 要： 目的：研究分析龙利叶的止咳药理作用和化学成分。方法：选择150只SPF级小鼠为研究对象，将其随机分为10组，每组各15只，龙利叶提取液分别用石油醚，氯仿，乙酸乙酯以及正丁醇进行萃取，采用小鼠氨水引咳法观察分析上述四个部位的止咳作用，观察分析小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数等指标，采用正相硅胶柱色谱法，重结晶法以及波普法等进行止咳有效部位的化学成分分析和鉴定。结果：除石油醚组外，上述各药物部位组均降低小鼠的2分钟咳嗽次数，且咳嗽潜伏期显著长于空白对照组，其中以龙利叶中的氯仿高浓度组和乙酸乙酯组以及正丁醇组的止咳效果最为突出。结论：龙利叶的止咳有效部位为乙酸乙酯部位和正丁醇部位以及氯仿高浓度组，其有效部位化学成分主要包括黄酮类化合物，甾体类化合物，挥发油类化合物，以及核苷类化合物。

关键词：龙利叶 止咳 药理作用 化学成分

中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1003-9082（2016）04-0284-01

龙利叶，又名龙舌草，牛耳叶等，原产地为越南北部地区，是我国的广东和广西民间传统的食疗药材和凉茶材料，根据有关资料[1]，龙利叶具有的药用功效主要为止咳化痰，润肺定喘，因此，临床上常采用龙利叶进行支气管炎，肺结核咳嗽等疾病的治疗，截至目前，我国有关龙利叶的研究报道仍然较少，研究采用小鼠实验法进行龙利叶的止咳药理作用和化学成分研究分析，现报道如下。

一、资料和方法

1.一般资料

研究所用的龙利叶购自药材专业市场，并且经过药材专家鉴定为大戟科守宫木属龙利叶（干燥叶），选择150只SPF级小鼠为研究对象，将其随机分为10组：空白对照组，阳性对照组，氯仿组（包括高浓度和低浓度2组），乙酸乙酯组（包括低浓度组和高浓度组），正丁醇组（包括低浓度组和高浓度组），石油醚组（包括低浓度组和高浓度组），每组15只，所选小鼠的体重范围为18g到22g，雌雄各半。

2.纳入标准

第一，采用氨水引咳法试验时，小鼠的2分钟咳嗽次数为10次到80次之间；第二，喷雾后，小鼠咳嗽潜伏期为15秒到50秒之间；第三，小鼠的反应平稳，状态良好。

3.方法

3.1止咳药理作用研究方法

将上述小鼠按照体重进行灌胃给药，给药标准为0.2ml/10g，每天1次，连续灌胃5天后进行正常饲养，给予空白对照组小鼠灌胃药物为生理盐水（剂量相同），给予阳性对照组小鼠采用枸橼酸喷托维林进行灌胃，实验前进行12小时的禁食，并且于最后一次给药之后的30分钟时，将上述小鼠放置分别在500ml的玻璃瓶内，采用WH-2000超声雾化器（生产企业为广东粤华医疗器械有限公司）向玻璃瓶内喷注浓氨水（生产企业为广州化学试剂厂），维持15s。

3.2化学成分萃取方法

取20g干燥的龙利叶粉碎成粗粉，采用90%的乙醇进行加热回流提取（每次2h，共提取2次），将得到的6750g总浸膏悬于水中，并且采用石油醚和氯仿，乙酸乙酯，正丁醇等进行多次萃取，减压得到最终的萃取液，包括石油醚部位浸膏423.8g，氯仿浸膏141.3g，乙酸乙酯部位浸膏21.4g，正丁醇部位浸膏40.0g，进一步采用波普法和硅胶柱层析，凝胶色谱柱和重结晶等进行行分离纯化和分析鉴定。

4.观察指标

观察分析小鼠的咳嗽潜伏期（放入小鼠即刻到发生咳嗽反应的时间差）和2分钟咳嗽次数（小鼠出现咳嗽的标准为，腹肌的剧烈收缩和张嘴，伴有轻微的咳嗽声）。

5.统计学方法

对上述两组患者各项记录数据进行分类和汇总处理，采取统计学软件SPSS19.0对上述汇总数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，计量资料采取平均值±标准差（x±s）表示，采用t检验， P<0.05为差异具有统计学意义，P<0.001为差异具有显著的统计学意义。

二、结果

1.龙利叶止咳药理作用

除石油醚组外，上述各药物部位组均降低小鼠的2分钟咳嗽次数，且咳嗽潜伏期显著长于空白对照组，其中以龙利叶中的氯仿高浓度组和乙酸乙酯组以及正丁醇组的止咳效果最为突出，各组别小鼠的2分钟咳嗽次数和咳嗽潜伏期情况如表1所示。

2.龙利叶止化学成分

针对止咳药理作用有效成分进行进一步的化学成分分析，共得到8个化合物，研究就其中6个化合物进行鉴定，包括：黄酮类化合物，①山奈酚；甾体类化合物：②β-谷甾醇，③谷甾醇-3-O-葡萄糖苷；挥发油类化合物（乙酸乙酯部位）：④邻苯二甲酸二丁酯；核苷类化合物：⑤腺苷，⑥尿苷。

讨论

根据资料[2]，龙利叶气微，味淡，微甘，是大戟科守宫木属植物，常见于我国的广东和广西地区的食疗药材中，龙利叶常用语进行呼吸道疾病例如支气管哮喘，支气管炎等疾病的治疗，但是截至目前，针对龙利叶的止咳药理作用和活性成分的临床研究仍然处于初期阶段，有关的报道也较少，因此，研究龙利叶的药理作用和生物活性具有重要的意义[3]。

龙利叶的止咳作用由大量临床事实证实[4]。研究就其止咳药理作用进行小鼠实验，根据研究结果，龙利叶的各个萃取部位（除石油醚部位外）的止咳作用均良好，与空白对照组差异显著，龙利叶的化学成分鉴定方面，研究针对其中8个化合物进行鉴定，氯仿部位提取的化合物主要为甾体类化合物-山奈酚，这是一种具有一定的止咳和抑菌作用；腺苷具有调节心肌供需平衡的作用，是一种良好的抗心律失常的药物，因此提示龙利叶具有一定治疗心脑血管疾病的作用[5]。

综上所述，龙利叶的止咳有效部位为乙酸乙酯部位和正丁醇部位以及氯仿高浓度组，其有效部位化学成分主要包括黄酮类化合物，甾体类化合物，挥发油类化合物，以及核苷类化合物。

参考文献

[1]丘琴.王莹.甄汉深.等. 龙利叶根化学成分的初步研究[J]. 中国民族民间医药. 2013（05）： 31-32.

[2]刘红丽.龙利叶和桫椤的化学成分及桫椤指纹图谱的研究[D]. 暨南大学， 2012.

[3]丁聪.贺勤.柳贤福. 龙利叶水提物的止咳祛痰作用研究[J]. 华西药学杂志. 2015（01）： 49-50.

[4]林慧.林斌.龙利叶抗过敏作用的实验研究[J]. 海峡药学. 2011（04）： 23-24.

[5]丘琴.张玲.甄汉深.等.龙利叶石油醚部位的化学成分研究[J]. 华西药学杂志. 2015（03）： 269-271.