李昌静，王作昭，王静静，刘永举，张　毅，毕玉敏，王冬冬，陈文雅，尹燕博，（.青岛农业大学动物科技学院，山东青岛6609；.吉林大学军需科技学院，吉林长春006；.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛660；.青岛农业大学生命科学学院，山东青岛6609；.青岛澳兰百特生物工程有限公司，山东青岛660）



鸡包涵体肝炎病毒荧光定量PCR滴度测定方法的建立及与不同滴定方法间的比较

李昌静1，王作昭2，王静静3，刘永举4，张毅3，毕玉敏1，王冬冬1，陈文雅5，尹燕博1，5
（1.青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109；2.吉林大学军需科技学院，吉林长春130062；3.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032；4.青岛农业大学生命科学学院，山东青岛266109；5.青岛澳兰百特生物工程有限公司，山东青岛266101）

摘要：本试验根据GenBank中I群禽腺病毒（FAV-Ⅰ）代表株AAU46933（CELO株）的Hexon基因序列设计一对通用引物，摸索了合适的扩增条件，建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法，并对9株鸡包涵体肝炎毒株的病毒滴度进行了测定，并与OD260法、鸡胚病变法以及细胞病变法测定的结果进行比较。试验结果表明，本方法的检测下限为0.98×102拷贝/μL。以细胞病变法为标准测定方法，经统计学分析发现，鸡胚病变法与细胞病变法之间无统计学差异（P=0.591）；荧光定量PCR法与细胞病变法测得结果之间存在线性相关性（相关系数r=0.965，P＜0.05）；OD260法与细胞病变法测得的结果间无相关性（P＞0.05）。以上结果说明，荧光定量PCR法测定结果能够间接反映病毒感染力，与传统方法相比，该方法操作简单、耗时短、成本低，具有较高的应用价值。

关键词：鸡；……