于天飞，陈　刚，张　双，史俊龙，朱可佳，张喜文（.齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江齐齐哈尔6006；.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨50030）



猪传染性胃肠炎病毒S蛋白C和D抗原位点在大肠杆菌中的串联表达

于天飞1，陈刚1，张双2，史俊龙1，朱可佳1，张喜文1
（1.齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江齐齐哈尔161006；2.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨150030）

摘要：使用大肠杆菌偏好性密码子人工合成了猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S蛋白C和D抗原位点多肽基因序列。依次将C和D抗原位点多肽基因序列克隆至表达载体pET-32a中。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta（DE3），经IPTG诱导表达，收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western Blot分析。结果显示，在分子量25 kDa处有1条明显的蛋白表达条带，且能被TGEV阳性血清识别。本研究为TGEV的血清学检测方法的建立提供了必要的物质基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒；纤突蛋白；抗原位点；串联表达

猪传染性胃肠炎（Transmissible gastroenteritis，TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus of swine，TGEV）引起的以仔猪腹泻为主要特征的传染病，2周龄以内发病仔猪的死亡率可达100%。研究表明，TGEV纤突（S）蛋白携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇，是惟一能诱导产生中和抗体和提供免疫保护作用的结构蛋白［1］。S蛋白含有4个抗原位点，从氨基末端开始依次定为C、B、D和A。其中位点C和位点D是不依赖于糖基化修饰的线性抗原表位［2］。因此，这两个位点适合在原核系统中进行体外表达。本研究拟在大肠杆菌表达系统中串联表达TGEV S蛋白C和D抗原位点，利用Western Blot方法检测重组蛋白的抗原性。……